1999年, 第29卷, 第2期　刊出日期：1999-06-10

  

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  水稻纹枯病拮抗细菌的种群分布及其生物多样性研究

  陈志谊, 许志刚, T. W. Mew

  植物病理学报. 1999, 29(2): 97-103.

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  通过对从菲律宾Laguna省水稻植株上分离获得的700个细菌菌株进行离体与生物测定发现:在水稻生态系统中,存在着大量格兰氏阴性、非致病性、对纹枯病有拮抗作用的细菌。用Biolog微板的方法鉴定了195个细菌菌株的种类。在147个格兰氏阴性菌株中有14个属39个种,在48个格兰氏阳性菌株中有8个属13个种。在195个被测菌株中最为常见的种是Stenotrophomonas maltophilia,Pseudomonas aeruginosa和Pseudomonas pudita,并且上述3个种内具有拮抗性能较强菌株的比例相当高。因此,这3个种的细菌对水稻病害的生物防治很有潜力。用PCR的方法分析上述3个细菌种部分菌株的生物多样性,结果表明:同一属不同种菌株之间的DNA带谱有一定的交叉;不同属之间的DNA带谱的差异明显大于种之间的差异。
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  细菌素Echcin防治作物真菌病害、细菌病害的研究

  吴健胜, 梁晶丹, 王金生

  植物病理学报. 1999, 29(2): 104-109.

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  细菌素Echcin是本研究室从来自水稻的菊欧氏菌(Erwinia chrysanthemi)中分离提取的一种抗菌物质。本试验报道了Echcin防治作物细菌病害、真菌病害的研究。采用纸碟法测定了Echcin对5个属植物病原细菌共14个菌株的抑制作用,琼脂稀释法测定了Echcin对12种植物病原真菌的抑制作用,在此基础上开展了Echcin对番茄早疫病和稻白叶枯病的温室盆栽试验,同时开展了Echcin对小麦纹枯病的田间小区试验。研究结果表明:Echcin对5个属植物病原细菌、辣椒疫霉、苎麻疫霉、番茄早疫等病原真菌具有很强的抑制作用。Echcin喷雾2次,对番茄早疫病的盆栽防病效果为75.8%。Echcin拌种或后期喷雾1次,对小麦纹枯病的田间防效达60%以上,优于井冈霉素。
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  植物青枯病原细菌胞外蛋白相关基因的克隆

  刘焕利, 何礼远, 毛国璋, 康耀卫

  植物病理学报. 1999, 29(2): 110-114,119.

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  用含有转座子Tn5的铜绿假单胞杆菌PAO1826(pMO75∷Tn5,Km^r)诱变我国马铃薯青枯菌小种3号菌株PO41,获得6000多个胞外多糖正常产生的接合子。经SDS-PAGE电泳,筛选出2个胞外蛋白减少9种的突变株PM2644和PM239,其可以引起烟草叶片典型的过敏性反应,致病力比野生型菌株显著降低,皆为原养型菌株。Southern杂交的结果表明,突变株染色体上只有1个转座子插入位点。标记交换证明,9种胞外蛋白缺失与转座子插入相偶联的频率为100%。以聚半乳糖醛酸酶和内葡聚糖酶2种胞外酶为指示蛋白进行定量测定的结果表明,在突变株上清液中和菌体细胞内都没有这2种胞外酶的存在。以突变株PM2644为受体菌,通过基因功能互补的方法,从野生型青枯菌基因文库筛选到2个阳性克隆pPSP1和pPSP2,它们既能恢复2个突变株产生胞外蛋白的能力,也能将2个突变株的致病力恢复到接近野生型菌株的水平。
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  黄淮区大豆花叶病毒株系组成与分布

  尚佑芬, 赵玖华, 杨崇良, 李长松, 路兴波, 辛相启, 罗瑞梧

  植物病理学报. 1999, 29(2): 115-119.

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  用8个大豆品种作为一组株系鉴别寄主,将黄淮豆区8省市202个毒株划分为7个株系(y₁~y₇)。y₁及y₂为弱毒株系,仅侵染感病品种(1138-2、文丰5号);y₃、y₄、y₅为中毒株系,分别侵染感病和中抗品种(齐黄10号、徐豆1号、诱变30、鲁豆4号);y₆及y₇为强毒株系,除侵染以上品种外,还侵染高抗品种(齐黄22、密荚1号)。全区弱毒株系占55.9%,中毒株系占28.7%,强毒株系占15.3%。江苏、山东、河南、河北、安徽和北京市以弱毒株系为主(43.5%~88.9%),山西省以中毒株系为主(50.0%),陕西省弱毒株系、中毒株系各占50.0%,山东、河南、河北3省强毒株系所占比例较高(22.4%~33.3%)。株系分布具有一定的稳定性。
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  水稻上三种条斑病细菌DNA的多态性初析

  姬广海, 孔繁明, 沈秀萍, 许志刚, 何礼远, 黄大日方

  植物病理学报. 1999, 29(2): 120-125.

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  试用40个引物对我国水稻条斑病菌、"稻短条斑病菌"和李氏禾条斑病菌等14个代表菌株进行RAPD分析,其中11个引物的扩增产物表现明显的多态性,共扩增出158条谱带,多态性为89.74%。聚类分析结果显示14个菌株可区分为3个类群,第1群包括LLS2、LLS3、LLS4、RS05、R1008、TAS和TAX;来自不同稻区水稻条斑病菌的群体结构差异明显,分属于第2群(如RS-Hai等)和第3群(如RS105等)。菌株DNA-RAPD指纹分析和致病性测定结果证明:李氏禾条斑病菌、"稻短条斑病菌"在水稻和李氏禾上不仅可相互侵染,而且遗传背景的相似性较高,确认是同一种病菌,其与小麦黑颖病菌亲缘关系较近,但与水稻细菌性条斑病菌具有明显差异。
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  水稻草矮病特异蛋白抗血清的制备及应用

  林丽明, 吴祖建, 谢荔岩, 林奇英, 谢联辉

  植物病理学报. 1999, 29(2): 126-131.

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  采用不同pH值沉淀法及超速离心获得提纯的水稻草矮病特异蛋白。提纯的S-蛋白具有典型的蛋白紫外吸收曲线,提纯产量为28 mg/100 g病叶。从SDS-PAGE精提纯的S-蛋白免疫兔子上获得抗血清,经微量沉淀反应、琼脂双扩散测定,其效价分别为1:1024和1:256。获得的S-蛋白抗血清与提纯的S-蛋白及感病植株,在琼脂双扩散反应中,均有明显的沉淀线出现,对照健株及提纯的水稻草矮病毒则无反应。利用制备的S-蛋白抗血清经A-蛋白酶联免疫吸附法检测,结果表明:S-蛋白抗血清与提纯S-蛋白及感病植株有专化性反应,且不同品种、不同部位、接种后不同发病时间的水稻病株中S-蛋白的积累量有差异,这就为RGSV的检测提供了一种快速、简便的方法。
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  黄瓜花叶病毒运动蛋白基因及其缺失突变体在大肠杆菌中的表达和表达产物的纯化

  张振臣, 李大伟, 张力, 于嘉林, 刘仪

  植物病理学报. 1999, 29(2): 132-137.

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  利用CMV Fny株系RNA3全长cDNA克隆,构建了运动蛋白(MP)基因5'端缺失突变体和3'端缺失突变体的原核表达载体。SDS-PAGE分析表明,经IPTG诱导,MP基因及其2种缺失突变体均能在大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中高效表达。利用分离包含体的方法,提纯了全长的及C端缺失的MP。光密度扫描分析表明,提纯产物的纯度达96.6%。
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  芸苔链格孢菌毒素对白菜细胞膜透性、SOD酶和POD酶活性的影响

  董金皋, 樊慕贞, 韩建民, 刘书华, 曹丽慧

  植物病理学报. 1999, 29(2): 138-141.

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  本文以白菜幼苗为材料,研究了芸苔链格孢菌毒素(AB-毒素)对白菜叶片细胞膜透性及叶片内SOD酶、POD酶活性变化的影响。结果表明,白菜叶片用AB-毒素处理后,细胞膜透性增大,且随处理时间的延长和毒素浓度的增加而增高。不同白菜品种用毒素处理后膜透性的改变与病菌接种的发病程度呈正相关,即电导率大的白菜品种,叶片发病也重。试验结果还发现,芸苔链格孢菌及其毒素处理白菜后,体内SOD酶和POD酶活性的变化基本趋于一致,即处理后12 h内急剧下降,然后(12~48 h)活性上升。而对照处理基本变化不大。可见,芸苔链格孢菌毒素表现了与其病原菌一致的致病作用。
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  产harpin的成团泛菌工程菌的构建

  赵立平, 申泉, 李艳琴, 宁红秀, 张晋丹, 董汉松, 刘爱新, 徐文联, 段明星

  植物病理学报. 1999, 29(2): 142-146.

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  梨火疫病菌(Erwinia amylovora)产生的胞外蛋白harpin是引发其非寄主植物过敏反应的因子。harpin蛋白还具有诱导植物抗性的功能。成团泛菌(Pantoea agglomerans)308R对链格胞属(Alternaria)的真菌具有拮抗活性,是一株抗利福霉素的自发突变株,对壮观霉素敏感。本文通过电击转化法将带有梨火疫病菌hrp基因簇的重组质粒pCPP430导入308R。所得转化子具有pCPP430的壮观霉素抗药性标记,在番茄上引起过敏反应;从转化子中提取到与pCPP430大小一样的质粒,其酶切物理图谱也与pCPP430完全相同;用地高辛标记的harpin的结构基因hrpN为探针对转化子中的质粒进行Southern blotting分析,结果在转化子中得到信号明显的杂交片段,而受体菌308R中未出现杂交信号;提取细菌的外壁的蛋白质进行PAGE分析,在大约44 kd的位置上308R(pCPP430)比308R明显多出1条带。这些结果表明成团泛菌能够表达梨火疫病菌的hrp基因簇,所产harpin蛋白也是有活性的。
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  三个小麦野生近缘种抗条锈性传递的初步研究

  井金学, 傅杰, 袁红旭, 王美南, 商鸿生, 李振岐

  植物病理学报. 1999, 29(2): 147-150.

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  以当前小麦条锈病菌的优势小种条中29号、30号和31号测定了小麦近缘植物长穗偃麦草、簇毛麦和华山新麦草及其各自与小麦的杂交后代的抗条锈性。试验结果表明,3个小麦近缘植物均含有宝贵的抗条锈基因,此类基因具有较强的传递性能,可在小麦遗传背景下高度表达,表现出良好的抗条锈性能,具有广阔的应用前景。
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  杨树细胞壁HRGP和木质素的诱导积累与其对溃疡病抗性的关系

  胡景江, 朱玮, 文建雷

  植物病理学报. 1999, 29(2): 151-156.

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  杨树溃疡病菌(Dothiorella gregaria)及其菌丝体提取物和培养滤液都能诱导杨树细胞壁富含羟脯氨酸糖蛋白(HRGP)和木质素的积累,但其诱导的速度和强度在抗病树种和感病树种间有明显差异。毛白杨(抗病)这2种物质不仅积累的速度快,且积累的幅度也远大于北京杨(感病)。在病原菌侵染和诱导处理中,杨树细胞壁的HRGP积累与木质素的沉积在积累的量上和时间进程上都明显相吻合。这在一定程度上表明HRGP和木质素与杨树对溃疡病的抗性有关,是其抗病反应因素之一。
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  利用DAS-ELISA进行番茄花叶病毒的田间检测

  薛朝阳, 周雪平, 青玲, 李德葆, 石银鹿, 张琦

  植物病理学报. 1999, 29(2): 157-162.

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  从制备的番茄花叶病毒(ToMV-S1)抗血清中提纯IgG,并用过碘酸钠法进行辣根过氧化物酶(HRP)标记,建立了检测ToMV的DAS-ELISA系统。利用此检测系统并结合生物学方法,对浙江及山西等地的田间病样进行测定,结果发现茄子、番茄等茄科作物中均有ToMV的侵染,其中茄子中有50%左右的发生率,番茄中ToMV发生率南北差异较大,在浙江发生率仅为10%左右,而在山西有60.7%的发生率,辣椒中未测到ToMV。这是在我国首次进行ToMV的田间发生情况检测。
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  应用组织培养技术离体筛选枸杞抗根腐病变异体的研究

  曹有龙, 贾勇炯, 赵军, 陈晓斌, 陈放

  植物病理学报. 1999, 29(2): 163-168.

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  用宁夏枸杞-宁杞1号的髓组织进行离体培养,诱导产生胚性愈伤组织,并用⁶⁰Co-γ射线进行诱变,以枸杞根腐菌尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum Schlecht)菌株产生的培养滤液为选择剂,筛选抗性变异体,在含毒素60%的条件下,一次性获得抗根腐病毒素的愈伤组织,抗性愈伤组织经稳定性分析,其抗性稳定。抗性愈伤组织在含30%的毒素培养基中可分化成再生植株,共获得25株,其叶片经用根腐菌分生孢子液接种鉴定,有6株抗病;再生植株经过脯氨酸、叶绿素含量分析,二者含量都有所提高;经过过氧化物同工酶酶谱分析,抗性再生植株酶谱带数有增加;说明经筛选得到的抗性再生植株是抗根腐病的变异体。
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  表面活性剂APSA-80对井冈霉素的增效作用研究

  黄炳球, 胡美英, 黄端平, 侯任环, 翁群芳

  植物病理学报. 1999, 29(2): 169-173.

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  在750倍的井冈霉素药液中加入0.01%、0.02%和0.04%浓度的表面活性剂APSA-80后,其表面张力降低了32.87%~53.66%、药液液滴在水稻的叶表面和叶背面的接触角分别降低了25.26%~51.98%和36.88%~47.34%,在叶鞘上降低22.38%~37.18%;药液在叶片上的沉积量提高约1.6倍;盆栽试验结果表明,APSA-80能够提高井冈霉素药液抗雨水冲刷能力;田间药效试验结果显示,APSA-80能够提高井冈霉素防治纹枯病的效果和延长其持效期。药后14 d,加入0.02%和0.04% APSA-80的处理防效明显高于单用;药后21 d,加入0.04%的,防效仍保持86.58%(96年)和90.93%(97年),极明显高于单用。
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  我国葡萄白腐病菌分类地位的重新确定研究

  刘长远, 赵奎华, 王克, 白金铠

  植物病理学报. 1999, 29(2): 174-176.

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  葡萄白腐病是重要的葡萄病害之一,造成产量损失极大。本文通过对白腐病菌光学与超微结构观察,明确了我国白腐病菌为白腐垫壳孢(Coniella diplodiella(Speg.)Petrak&Sydow),而不是白腐盾壳霉(Coniothyrium diplodiella(Speg.)Sacc.)。该菌分生孢子器内基部具垫状结构,产孢方式内壁芽生瓶梗式,分生孢子光滑,无瘤突。
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  山东菏泽地区牡丹根腐病病原真菌的分离鉴定

  孙文姬, 简桂良, 刘秀兰, 范朝双

  植物病理学报. 1999, 29(2): 177-180.

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  1995~1997年从山东菏泽61株牡丹根腐病病根样品中分离获得121个分离物,经初步鉴定归属于13个属(种)。对出现频率最高的优势菌进一步鉴定,根据其培养特性、生长速度、产孢细胞、孢子形态、孢子量度和致病性等,按C.Booth镰刀菌分类系统,定名为镰刀菌属,茄病镰刀菌[Fusarium solani(Mart.)Sacc.],该菌所致的牡丹根腐病为首次报道。
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  北方棉区棉花黄萎病菌落叶型菌系鉴定

  莉梅, 石磊岩

  植物病理学报. 1999, 29(2): 181-189.

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  采用RAPD扩增与温室致病性测定2种方法,以黄萎病菌Verticillium dahliae的5个落叶型、7个非落叶型菌系和V.albo-atrum的2个菌系为对照,对采自北方棉区6省(自治区)的34个棉花黄萎病菌菌系进行致病型鉴定。94.1%的菌系在2种鉴定结果中表现一致,与对照菌系相比较,确定其中26个菌系为落叶型菌系,6个菌系为非落叶型菌系。从而证实了黄萎病菌落叶型菌系在北方棉区河北、河南、山东3省的存在,并发现所确定的26个北方落叶型菌系中的22个与来自美国的对照落叶型菌系T₉、V₄₄的关系比与来自江苏的对照落叶型菌系V_B、V₉₉₁的关系更近。本实验还初步筛选到2条用于鉴别V.dahliae落叶型与非落叶型菌系的RAPD特异条带OPB-19₉₆₆和OPM-20₁₆₉₁,将它们用于对34个北方菌系的RAPD扩增鉴定,则与温室致病性测定结果的一致性分别为88.2%和94.1%,证明这2条特异条带在鉴定棉花黄萎病菌落叶型菌系上具有一定的实用价值,并为进一步制作特异探针以形成一套简便、准确、规范化的鉴定技术奠定了基础。
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  S-10菌株产生抗生素的初步鉴别及其应用研究

  立孝, 李宝笃, 张建丽, 吴献忠

  植物病理学报. 1999, 29(2): 190-190.

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  烟草赤星病是由半知菌属的赤星病菌(Alternaria alternata)侵染烟草引起的病害。该病在全国各烟区已普遍发生,严重威胁着烟草的生产,但目前尚无理想的控制措施和方法。
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  苎麻疫霉遗传学研究

  高智谋

  植物病理学报. 1999, 29(2): 191-192.

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  本文首次对引致我国棉花、苎麻疫病的重要同宗配合疫霉种-苎麻疫霉(Phytophthora boehmeriae Sawada)的菌落形态、生长速率、同宗配合特性、致病力、对甲霜灵抗性以及雄器着生位置等生物学性状的遗传与变异进行了较系统的研究。
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  非荧光植物假单胞菌的分类和鉴定

  胡方平

  植物病理学报. 1999, 29(2): 192-192.

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  对非荧光植物假单胞菌(Pseudomonas spp.)的14个种的105个菌株进行56项生理生化测试,