植物病理学报

Select

王丽平, 傅竞也, 张仁, 王强, 刘文江

植物病理学报. 2026, 56(1): 1-13. https://doi.org/10.13926/j.cnki.apps.000977

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

植保素是植物受病原菌诱导产生的次生代谢物,具有广谱抗病性和物种特异性,在增强作物产量和保障作物品质方面扮演中着不可或缺的作用。其中,萜类植保素包括倍半萜、二萜、三萜等,它们大部分的生物合成途径已被解析,存在基因簇或基因串负责萜类植保素生物合成的现象,并且基因簇上的基因具有共调控和共响应的特性;多个萜类植保素的调控因子已被报道。本综述旨在归纳整理萜类植保素的代谢调控研究进展,提出萜类植保素的应用展望,为抗性育种和绿色防控提供理论依据。

Select

江苏省稻曲病菌交配型群体分布特征及致病力差异

潘夏艳, 李鸷, 俞咪娜, 刘永锋

植物病理学报. 2026, 56(1): 14-20. https://doi.org/10.13926/j.cnki.apps.000963

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

有性生殖是稻曲病菌病害循环和生活史中的重要环节,稻曲病菌(Villosiclava virens)为异宗配合真菌,交配型群体分布直接关系着V. virens田间有性态发生的频率,对稻曲病的流行预警和防控具有重要的指导意义。本研究以2023年和2024年在江苏省采集并分离的255株V. virens单孢菌株为对象,开展病原菌群体的交配型检测,明确江苏省V. virens的交配型群体分布。通过PCR技术检测结果显示,江苏省10个不同地区的V. virens群体均以MAT1-1型为优势交配型群体,MAT1-1型和MAT1-2型交配型菌株比例为1.71,遗传中出现了交配型偏离现象。进一步对不同交配型群体致病力分析发现,MAT1-1型致病力明显高于MAT1-2型;随后使用Wilcoxon分析显示,致病力和交配型类型之间存在显著相关性,表明V. virens中不同交配型群体间可能存在致病力分化。对比2023年和2024年江苏省不同地区交配型群体分布特点发现,除了有性生殖和致病力,V. virens交配型群体结构可能还受无性繁殖影响。本研究首次明确了江苏省V. virens交配型群体分布特征及不同交配型群体间致病力分化差异,并间接揭示了有性生殖和无性繁殖在V. virens交配型群体变化和稻曲病侵染循环中均具有重要作用。

Select

黄淮烟区烟草根结线虫病的发生分布与病原鉴定

任豪豪, 苗圃, 李荣超, 郑潜, 刘晓凯, 周扬, 蒋士君, 王惠, 崔江宽

植物病理学报. 2026, 56(1): 21-30. https://doi.org/10.13926/j.cnki.apps.000968

摘要 ( ) PDF全文 ( ) 附加材料

可视化

为明确黄淮烟区烟草根结线虫病的发生分布,2018—2023年对我国黄淮烟区4省12个重点植烟市120个烟区的烟草根结线虫病进行普查。采用形态学结合分子生物学方法对根结线虫进行种类鉴定,阐明了黄淮烟区烟草根结线虫的最新种群分布。结果表明,根结线虫在黄淮烟区发生普遍,其中南方根结线虫(Meloidogyne incognita)为优势种群,花生根结线虫(M. arenaria)、北方根结线虫(M. hapla)和爪哇根结线虫(M. javanica)在局部地区小规模发生。在120个烟区中,109个检测出M. incognita、32个检测出M. arenaria、8个检测出M. hapla、3个检测出M. javanica;检出率分别为90.83%、检26.67%、6.67%和2.50%。部分烟区发生不同根结线虫种的复合侵染,其中18个烟区为M. incognita和M. arenaria复合侵染(15.00%),5个烟区为M. incognita和M. hapla复合侵染(4.17%),3个烟区为M. incognita和M. javanica复合侵染(2.50%),3个烟区为M. incognita、M. arenaria和M. hapla复合侵染(2.50%)。对土壤中根结线虫二龄幼虫(J2)进行分离,结果发现平顶山地区烟田土壤J2数量最多,平均高达465.74头/100 mL土;其次为南阳地区的和洛阳地区,J2数量分别为398.17和276.79头/100 mL土。同时发现烟草根结线虫病重发地区,根茎类病害发生同步加重。本研究明确了烟草根结线虫病已成为黄淮烟区严重威胁烟草生产的重要病害,阐明了黄淮烟区烟草根结线虫病的发生分布和为害损失,更新了我国作物根结线虫的种群发生动态。研究结果为我国根结线虫的监测预警和烟草根结线虫病的防控,奠定了重要的理论基础和数据支撑。

Select

2024年黄淮麦区潜育期小麦条锈菌的PCR检测

马发兵, 卞悦, 黄亮, 翟福坤, 张兴宗, 张昊, 曾娟, 高利, 陈万权, 刘太国

植物病理学报. 2026, 56(1): 31-39. https://doi.org/10.13926/j.cnki.apps.000973

摘要 ( ) PDF全文 ( ) 附加材料

可视化

快速检测小麦叶片是否有条锈菌(Puccinia striiformis f. sp. tritici,Pst)潜伏侵染,可为小麦条锈病预测和防治提供依据,对控制条锈病危害保障粮食安全具有重要意义。本研究通过普通PCR技术,利用已发表的引物组合betaf/betar对苗期不同接种时间、小麦叶片内Pst进行分子标记检测。结果表明,接菌后26 h即可检测到Pst扩增产物。同时,对采自陕西、湖北、安徽、河南、山东、山西等6个省份268份田间小麦叶片样品进行PCR扩增,结果表明,共有45份叶片样品可能存在Pst潜伏侵染,占总样品的16.79%。其中,河南、山西、陕西、湖北、山东分别有29、10、3、2和1份样品检测出Pst,安徽未检测到处于潜育期的Pst样品。

Select

甘蔗镰孢菌存活因子基因FsSvf1的功能研究

黄浩华, 覃俏惠, 石前, 陈保善, 蒙姣荣

植物病理学报. 2026, 56(1): 40-51. https://doi.org/10.13926/j.cnki.apps.001673

摘要 ( ) PDF全文 ( ) 附加材料

可视化

甘蔗梢腐病是影响甘蔗产量的重要真菌性病害之一,在我国其主要病原菌为甘蔗镰孢菌(Fusarium sacchari)。存活因子Svf1最早在酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)中被报道,在真菌的生长、发育和致病过程中发挥着重要作用。F. sacchari基因组中存在一个Svf1同源基因FsSvf1,二者编码蛋白的氨基酸序列具有46.4%相似性。FsSvf1转录水平在F. sacchari侵染甘蔗72 h时显著上调。同野生型菌株相比,FsSvf1敲除突变体(ΔFsSvf1)菌丝生长减慢,菌落边缘菌丝生长更加致密,分生孢子产量增加;在胡萝卜培养基上子囊壳的形成数量减少,成熟时间延缓;对NaCl胁迫的敏感性提高,对刚果红、SDS和H₂O₂的敏感性降低;对甘蔗的致病力显著下降。这些结果表明,FsSvf1是一个对F. sacchari生长、发育和致病都具有重要作用的因子,具有成为病害防治靶标的潜力。

Select

山田胶锈菌核定位效应蛋白GyBarwin55和GyRlpA22的激发子活性分析

刘萍, 邵晨曦, 梁英梅

植物病理学报. 2026, 56(1): 52-61. https://doi.org/10.13926/j.cnki.apps.001684

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

植物病原真菌分泌的核定位效应蛋白能够进入宿主植物细胞核,干扰细胞核的生物学功能。解析核定位效应蛋白在山田胶锈菌(Gymnosporangium yamadae)侵染苹果(Malus domestica)过程中调控寄主免疫反应的分子机制对于揭示G. yamadae-苹果互作机制具有重要意义。在前期我们获得了2个G. yamadae候选核定位效应蛋白GyBarwin55和GyRlpA22,通过农杆菌介导的烟草瞬时转化系统进行亚细胞定位分析,发现GyBarwin55特异性定位在细胞核上,GyRlpA22在细胞质和细胞核上都有分布。实时荧光定量PCR(Quantitative real-time PCR, qPCR)分析结果表明,这2个效应蛋白在G. yamadae侵染苹果的性孢子发育阶段显著上调表达。农杆菌介导的本氏烟中异源表达、苹果叶片中的原位表达结果显示:这2个核定位效应蛋白均具有激发子活性,但定点突变GyBarwin55和GyRlpA22的核定位信号(Nuclear localization signal, NLS)序列后,它们的荧光信号均不在细胞核中分布,激发子活性也随之丧失。上述结果表明GyBarwin55和GyRlpA22的细胞核定位与激发子活性离不开NLS序列,二者在G. yamadae-苹果互作过程中发挥了重要作用。

Select

桃褐腐病菌MfHOX1基因生物学功能研究

肖媛玲, 曾哲政, 蔡民政, 杨静雅, 覃英, 阴伟晓, 罗朝喜

植物病理学报. 2026, 56(1): 62-74. https://doi.org/10.13926/j.cnki.apps.001680

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

实生链核盘菌(Monilinia fructicola)引起的桃褐腐病常年威胁我国桃生产并造成巨大损失,解析桃褐腐病菌关键致病因子对于有针对性地防治桃褐腐病十分重要。本研究利用分割标记法构建桃褐腐病菌MfHOX1基因敲除突变体及回补菌株,解析了MfHOX1的生物学功能。研究表明,同野生型菌株相比,MfHOX1敲除突变体菌丝生长速率显著下降,产孢量增多,对外源胁迫诱导剂H₂O₂、SDS、CR、CaCl₂、NaCl的敏感性降低,而对甘油、山梨醇、葡萄糖的敏感性升高;此外,MfHOX1敲除突变体的致病力显著降低,致病相关基因MfAP1、MfPG1、MfCUT1、MfPmk1、MfSSP和MfHsbA1的表达量显著升高。上述结果表明MfHOX1基因参与调控桃褐腐病菌生长、产孢、对外源胁迫的应答以及致病过程。

Select

候选效应蛋白CSEP03399促进橡胶树白粉菌在拟南芥上的致病性机制初探

孙淑男, 梅双双, 戎伟

植物病理学报. 2026, 56(1): 75-85. https://doi.org/10.13926/j.cnki.apps.000966

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

橡胶树白粉菌(Oidium heveae)利用分泌到植物细胞内的效应蛋白帮助其完成生活世代。O. heveae候选效应蛋白基因CSEP03399 (candidate secreted effector proteins) 编码N端分泌信号肽,并且在O. heveae侵染过程中诱导表达。通过在Col-0背景下过表达CSEP03399基因,并未产生可见的细胞死亡,推测候选效应蛋白CSEP03399在植物体内不作为一个无毒基因发挥功能。接种O. heveae,CSEP03399可以明显促进O. heveae早期菌丝生长及后期分生孢子形成,以及显著降低O. heveae激发的活性氧产生,细胞死亡和PR1(pathogenesis related 1)基因表达,暗示CSEP03399在寄主体内是一个毒性效应蛋白。然而,CSEP03399并不抑制拟南芥抗白粉病基因WRR4B(white rust resistance 4B)以及丁香假单胞菌(Pseudomonas syringae) DC 3000 avrB和DC 3000 avrRpt2激发的超敏反应。分别利用鞭毛蛋白和几丁质处理空载体以及CSEP03399转基因植物后,通过qPCR发现,CSEP03399可以特异抑制几丁质激发的FRK1(FLG22-induced receptor-like kinase 1)和WRKY22基因表达,增强P. syringae DC 3000和DC 3000 hrcC^-在几丁质处理后植物上的致病性。综上结果表明,候选效应蛋白CSEP03399可能通过抑制几丁质激发的免疫信号通路发挥其毒性功能。

Select

广西稻瘟菌无毒基因AVR-Pita变异分析

张小雨, 刘莉, 杨红, 邱结华

植物病理学报. 2026, 56(1): 86-96. https://doi.org/10.13926/j.cnki.apps.001682

摘要 ( ) PDF全文 ( ) 附加材料

可视化

田间稻瘟病菌菌群具有复杂的遗传结构,特别是其无毒基因变异快,是造成抗病水稻品种在种植数年后抗病性减弱的主要原因。因此,监测稻瘟菌无毒基因变异情况对于水稻抗病品种的合理布局具有重要的指导意义。本研究利用聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction,PCR)、Sanger测序(Sanger sequencing)等技术分析了来自广西壮族自治区不同水稻种植区的84株稻瘟菌中无毒基因AVR-Pita的分布和变异情况。结果表明,在这84株稻瘟菌中,有66株能够扩增得到AVR-Pita基因区段。将所得AVR-Pita基因序列与NCBI中公布的AVR-Pita序列进行对比,发现这66个菌株含有6种AVR-Pita变异类型(AVR-Pita H1~H6)。进一步将这6种AVR-Pita变异类型的稻瘟菌菌株进行活体水稻喷雾接种、离体叶片划伤接种,以检测其致病性,结果显示这6种变异类型的菌株均能侵染携带Pi-ta基因的丽江新团黑谷(Pi-ta-LTH),表明这6种变异型不能被抗病基因Pi-ta识别。本研究揭示了广西壮族自治区稻瘟菌中AVR-Pita基因的变异情况,以及定期对该无毒基因变异情况进行监测的重要性。这一发现不仅为广西壮族自治区合理布局含抗病基因Pi-ta的水稻品种提供了科学依据,也为制定有效的稻瘟病防控策略奠定了基础。

Select

ComX对贝莱斯芽胞杆菌B31生防性状及抑制番茄枯萎病菌活性的影响

姜倩倩, 苏振贺, 刘高鸽, 魏亚蕊, 刘晓萌, 郭庆港, 魏学军, 马平

植物病理学报. 2026, 56(1): 97-105. https://doi.org/10.13926/j.cnki.apps.001678

摘要 ( ) PDF全文 ( ) 附加材料

可视化

细菌可通过群体感应系统调控其代谢活动以适应外部环境,其中ComQXPA是芽胞杆菌的主要群体感应系统。贝莱斯芽胞杆菌(Bacillus velezensis)B31菌株在防治番茄和瓜类枯萎病方面表现出显著效果,本研究旨在探讨群体感应ComX信号分子对B. velezensis B31菌株生防性状的影响。通过对B. velezensis B31菌株中ComX信号分子合成基因进行缺失突变,获得突变体ΔcomX,同时构建其互补菌株CPΔcomX,在此基础上比较野生型B31菌株、突变体及其互补菌株在生防性状等方面的差异。结果表明,comX缺失突变对于B31菌株的生长无明显影响,但显著影响了其菌落形态、生物膜形成和游动性,且显著降低了其胞外酶活性、芽胞形成率以及对番茄枯萎病菌的抑菌活性。该研究明确了ComX对B31菌株生防性状的影响,为进一步利用该菌株进行生物防治提供了理论依据。

Select

辣椒炭疽菌杀菌剂敏感性分析及苯并咪唑类杀菌剂对斯科维尔炭疽菌β-tubulin基因表达的影响

韩双, 王宏栋, 张煜, 张超, 张自坤, 陈晓乐

植物病理学报. 2026, 56(1): 106-116. https://doi.org/10.13926/j.cnki.apps.001679

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

本文系统比较了可引起辣椒炭疽病的33株炭疽菌对嘧菌酯、三唑醇、丙环唑、咪鲜胺、异菌脲、甲基硫菌灵和三氟吡啶胺共计7种杀菌剂的敏感性及其交互相关性。结果表明,其中6种杀菌剂(嘧菌酯、三唑醇、丙环唑、咪鲜胺、异菌脲和甲基硫菌灵)对这33株炭疽菌的平均EC₅₀值分别为(147.254±76.028)、(15.900±24.1368)、(1.281±1.664)、(0.217±0.266)、(3.183±2.253)和(61.240±51.893) μg·mL^-1,而三氟吡啶胺对辣椒炭疽菌无抑制作用。这6种杀菌剂中,供试炭疽菌仅对嘧菌酯的敏感性频率符合正态分布,而对其他5种杀菌剂(三唑醇、丙环唑、咪鲜胺、异菌脲和甲基硫菌灵)的敏感性频率均不符合正态分布,提示田间已经出现了对这5种杀菌剂敏感性下降的炭疽菌群体。Spearman相关性分析结果表明,辣椒炭疽菌对三唑醇、丙环唑、咪鲜胺这3种甾醇脱甲基化抑制剂类杀菌剂 (Sterol demethylation inhibitors,DMIs)的敏感性之间均存在显著正相关性;对甲基硫菌灵与对这3种DMIs杀菌剂的敏感性之间呈显著的正相关性;对异菌脲与对这3种DMIs杀菌剂以及甲基硫菌灵的敏感性之间呈显著的负相关性;而对嘧菌酯和其余供试药物的敏感性之间均无相关性。从供试辣椒炭疽菌株中,选取对苯并咪唑类杀菌剂 (Methyl benzimidazole carbamates, MBCs)甲基硫菌灵敏感性表现不同的斯科维尔炭疽菌 (Colletotrichum scovillei)菌株,以β-tubulin基因为靶标进行扩增、测序和比对分析,结果发现对甲基硫菌灵敏感性降低的C. scovillei菌株的β-tubulin基因均未发生位点突变,但在该杀菌剂作用下,敏感性降低的菌株比敏感性较高菌株该基因表达量更高。研究结果对科学选择杀菌剂以及合理交替用药防治辣椒炭疽病具有指导作用,也为MBCs抗性炭疽菌分子检测研究提供了数据支撑。

Select

分离烟草黑胫病菌的新型选择性培养基研制

彭永辉, 肖华刚, 毛辉, 王灿, 周向平, 肖艳松, 谢甲涛, 郑露, 刘天波

植物病理学报. 2026, 56(1): 117-122. https://doi.org/10.13926/j.cnki.apps.001676

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

由烟草疫霉(Phytophthora nicotianae)引发的烟草黑胫病是烟草产区发生的一种主要土传病害,近年来常与镰刀菌根腐病复合发生,给黑胫病菌的分离和纯化带来了极大困难。为了从这两种病害复合侵染的烟草样品中高效分离获得烟草黑胫病菌,本研究开发了针对该病菌的新型选择性培养基。选择适当剂量精甲·咯菌晴、恶霉灵、苯醚甲环唑、氟啶胺、抑霉唑和戊唑醇分别加入燕麦琼脂培养基中,测定不同含药培养基对茄病镰刀菌(Fusarium solani)、尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)、烟草黑胫病菌的抑制作用以及针对不同病菌复合侵染的烟草样品中黑胫病菌的分离率,发现50 μg·mL^-1抑霉唑、20 μg·mL^-1戊唑醇均能有效抑制茄病镰刀菌和尖孢镰刀菌的菌丝生长,但对烟草黑胫病菌的抑制作用较小。从田间采集黑胫病菌和根腐病菌复合侵染的烟草病样,使用含有抑霉唑或戊唑醇的培养基分离病原菌,结果烟草黑胫病菌的分离率高达80%~90%,而使用普通燕麦琼脂培养基时烟草黑胫病菌的分离率仅为35%。因此,使用含有50 μg·mL^-1抑霉唑或20 μg·mL^-1戊唑醇的选择性培养基均能从黑胫病和根腐病复合发生的烟草病株中高效分离获得烟草黑胫病菌。

Select

基于RPA/CRISPR-Cas12a技术的马铃薯种薯Ralstonia solanacearum快速检测方法

周健, 刘文雯, 杨巧梅, 吴彦瑢, 司立平, 罗展宏, 唐唯, 海洋

植物病理学报. 2026, 56(1): 123-131. https://doi.org/10.13926/j.cnki.apps.000976

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

马铃薯(Solanum tuberosum L.)为粮菜兼用作物,是我国四大主粮之一。近年,由Ralstonia solanacearum引起的植株青枯及块茎腐烂,在我国西南马铃薯主产区普遍发生,严重影响马铃薯的产量及品质。病原菌的早期诊断是建立病害综合防控体系的重要环节。因此,亟需建立一种快速、准确和灵敏度高的田间检测方法。本研究根据GenBank中fliC全长基因序列,设计特异性重组酶聚合酶扩增(Recombinase polymerase amplification, RPA)引物和CRISPR-Cas12a crRNA,建立RPA与CRISPR-Cas12a相结合的等温扩增方法,并通过荧光和试纸条两种可视化方法进行结果判定。研究通过优化RPA/CRISPR-Cas12a 的反应条件,发现在 37 ℃恒温条件下,以R. solanacearum侵染后处于潜育期的种薯为研究对象,分别进行荧光检测及试纸条检测,两种方法均可特异性检测出R. solanacearum,而对其他马铃薯主要病原及土壤常见菌株均无有效扩增。此外,研究发现荧光法检测极限可达10 fg·μL^-1,试纸条检测极限为100 fg·μL^-1。研究进一步利用试纸条法开展现场快速检测,发现该方法操作简便且无需昂贵的实验设备,适合田间即时诊断。通过对不同批次种薯的现场检测, RPA/CRISPR-Cas12a试纸条法能够准确检测出被R. solanacearum潜伏侵染的种薯。本研究所开发的RPA/CRISPR-Cas12a方法可用于种薯感染R. solanacearum的早期检测, 有利于马铃薯病害的早期预防及病害诊断。

Select

菜豆细菌性萎蔫病菌探针法实时荧光定量PCR检测技术的建立

牟桂萍, 闫晓东, 许然, 胡加谊, 曾杨森, 黎玮琪, 易建平

植物病理学报. 2026, 56(1): 132-141. https://doi.org/10.13926/j.cnki.apps.000971

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

为快速准确检测菜豆细菌性萎蔫病菌(Curtobacterium flaccumfaciens pv. flaccumfaciens, Cff),根据GenBank中Cff的序列设计特异性探针Cff-P,并首次建立了Cff探针法实时荧光定量PCR(TaqMan quantitative real-time PCR,qPCR)检测方法。经验证,探针Cff-P能扩增供试的34株Cff菌株,其他66株供试的非Cff菌株以及空白对照均为阴性,不同稀释度菌体DNA的扩增结果显示,该方法的检测灵敏度为50 fg·μL^-1菌体DNA。140个豆类种子样品的检测结果表明该检测方法可用于豆类种子样品中Cff的快速检测。本研究建立的TaqMan探针法实时荧光定量PCR检测方法,为我国农业部门和进境口岸Cff快速筛查提供了技术支持。

Select

侵染山药的五种病毒多重PCR检测方法的建立与应用

李想, 鲁书豪, 徐国豪, 高素霞, 文艺, 李绍建, 杨瑾, 李雪梦, 王飞, 鲁传涛, 秦艳红, 陈招荣

植物病理学报. 2026, 56(1): 142-149. https://doi.org/10.13926/j.cnki.apps.001375

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

山药种植过程中普遍受到多种病毒的复合侵染,严重影响其产量和品质。为了实现对多种山药病毒的高效、快速检测,本研究建立了一种可以同时检测油菜花叶病毒(youcai mosaic virus, YoMV)、日本山药花叶病毒(Japanese yam mosaic virus, JYMV)、蚕豆萎蔫病毒-2(broad bean wilt virus-2,BBWV-2)、山药潜隐病毒(yam latent virus, YLV)和山药黄斑花叶病毒(yam yellow spot mosaic virus, YYSMV)的多重RT-PCR检测方法,5种病毒扩增目的条带大小分别为:504、614、750、1 030和1 207 bp,最佳的退火温度为55 ℃,各病毒多重PCR添加特引物浓度分别为YoMV F/R 0.08 μmol·L^-1、JYMV F/R 0.04 μmol·L^-1、BBWV-2 F/R 0.16 μmol·L^-1、YLV F/R 0.32 μmol·L^-1、YYSMV F/R 0.24 μmol·L^-1,检测灵敏度为8.11×10⁵个拷贝·μL^-1。本检测方法可以高效、准确地检测山药上的5种病毒,极大的提高了检测效率,为山药病毒病的检测提供了技术支撑。

Select

两种双生病毒ToLCNDV和TYLCV双重RPA快速检测方法的建立

员雅楠, 韩雨菲, 高萍, 徐丽慧, 高士刚, 宋志伟, 曾蓉, 戴富明

植物病理学报. 2026, 56(1): 150-158. https://doi.org/10.13926/j.cnki.apps.001366

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

新德里番茄曲叶病毒(tomato leaf curl New Delhi virus,ToLCNDV)和番茄黄化曲叶病毒(tomato yellow leaf curl virus,TYLCV)均由烟粉虱传播,在自然条件下能复合侵染番茄,危害巨大。因此,建立一种准确、快速、能够同时检测这两种病毒的检测方法,对于快速诊断和田间监测具有重要的意义。本研究基于重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)技术,开发了一种靶向ToLCNDV和TYLCV的双重RPA检测方法,其灵敏度为10⁴ copies·mL^-1,反应仅需25 min,可用于植物和烟粉虱中ToLCNDV和TYLCV的检测,是鉴定和监测这两种病毒便捷和灵敏的新方法。

Select

基于RT-RPA-LFD技术的烟草轻型绿花叶病毒高灵敏快速检测方法的建立与应用

秦艳红, 鲁书豪, 于红卫, 郝学政, 薛凤杰, 高素霞, 文艺, 李绍建, 杨瑾, 李雪梦, 王飞, 鲁传涛

植物病理学报. 2026, 56(1): 159-165. https://doi.org/10.13926/j.cnki.apps.001365

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

根据烟草轻型绿花叶病毒(tobacco mild green mosaic virus, TMGMV)的外壳蛋白(coat protein,CP)基因设计引物和探针,将重组酶聚合酶扩增技术(recombinase polymerase amplification,RPA)和侧流层析试纸条(lateral flow dipstick,LFD)相结合,建立了一种TMGMV的快速检测方法,对该检测方法中的反应时间、反应温度进行了优化,并检测了该方法的特异性和灵敏度。试验结果表明,RT-RPA-LFD检测体系的最佳反应条件是温度37℃、反应时间30 min。该方法能够特异性检测TMGMV,与其它病毒无交叉反应,对TMGMV CP 的最低检测限度为1.65×10⁰拷贝·μL^-1,比普通 PCR 检测灵敏度高10倍。该方法灵敏度高、特异性强,能够用于田间地黄样品中TMGMV的检测,便于基层科研单位对该病毒的准确检测和诊断。

Select

基于LAMP技术的枣疯病植原体检测方法的建立与应用

赵娟, 程艳丽, 刘亚勇, 赵爽, 姜楠, 郑惠千, 王甦, 秦文韬

植物病理学报. 2026, 56(1): 166-172. https://doi.org/10.13926/j.cnki.apps.000969

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

由枣疯病植原体(Candidatus Phytoplasma ziziphi)侵染引起的枣疯病严重威胁枣产业健康发展。病害诊断和病原检测是枣疯病科学防控的关键环节,其实施依赖于高效灵敏的枣疯病植原体分子检测技术。本研究基于环介导等温扩增(LAMP)技术及其产物不同检测方式,建立了LAMP-凝胶电泳、LAMP-HNB/SYBR染料显色以及环介导等温扩增联合横向流动试纸条(LAMP-LFD)等三种Ca. Phytoplasma ziziphi可视化检测方法。结果显示,建立的LAMP检测方法对Ca. Phytoplasma ziziphi具有高度特异性,能够检测出Ca. Phytoplasma ziziphi DNA最低浓度为20 pg·μL^-1,较常规PCR灵敏100倍。三种检测方法适应于常规实验室、基层植保站等不同应用场景的Ca. Phytoplasma ziziphi可视化检测,对供试14份田间枣树样品中枣植原体的检出率为100%,明显高于常规PCR。本研究建立的LAMP 方法能够快速、特异、灵敏地检测Ca. Phytoplasma ziziphi,同时可免除高昂的仪器投入,适合田间推广使用,对枣疯病的早期诊断和监测预警具有重要意义。