植物水通道蛋白PIP不仅担负细胞间或细胞内外水分子输导的基本功能，还参与植物-微生物互作与植物防卫反应，这种双重功能的调控机制目前还不清楚。水稻OsPIP1;2和拟南芥AtPIP1;4可以与水稻黄单胞III型泌出蛋白Hpa1互作，Hpa1定位于植物细胞的质外体，诱导过氧化氢在质外体产生及向原生质转运，进而影响植物防卫反应与对病原细菌的抗性。根据植物水通道蛋白拓扑结构与病原细菌Ⅲ型分泌系统工作模型，水稻OsPIP1;2与Hpa1互作的功能域是互作发生的分子基础。互作引发信号转导，调控过氧化氢信号从植物细胞的质外体向原生质转运与植物防卫反应。由于Hpa1对Ⅲ效应蛋白来说具有转位子的功能特征，OsPIP1;2-Hpa1还可能对水稻黄单胞菌Ⅲ型效应蛋白从细菌细胞向植物细胞转运发生调控作用。围绕这些设想进行研究，可以深入阐释水稻-黄单胞菌互作机制，同时为植物水通道蛋白功能调控提供新的见解。

本研究根据大豆与疫霉互作的基因芯片数据,筛选了一个受疫霉诱导表达的大豆抗病相关基因(GmDRRP, glycine max disease resistance response protein),并对其启动子响应疫霉侵染的功能进行了研究。序列分析表明该基因编码一个大豆抗病相关蛋白。分别用SA、MeJA、ABA、ETH和GA₃五种激素处理后,发现该基因的表达受激素的抑制。克隆其转录起始位点上游1 590 bp的启动子区,生物信息学分析发现该区域包含多个已知与逆境响应相关的顺式元件。进一步将启动子构建在融合Gus报告基因的植物表达载体上,分别瞬时转化烟草和稳定转化大豆根毛,并检测了Gus报告基因的表达情况。结果表明,GmDRRP启动子均能在两种体系中不同程度的受疫霉诱导,其表达模式为接种后0.5 h被快速诱导,并在2 h时显著提高。根据生物信息学对顺式元件的预测结果,对启动子进行了分段分析,获得了一个222 bp的小片段,其疫霉诱导表达能力是全长启动子的34%。以上结果表明大豆的GmDRRP启动子能被疫霉快速诱导。

近年来,大蕉枯萎病在广东省东莞市发生严重,为了有效控制病害发生蔓延,生产上急需明确大蕉枯萎病的病原。本研究收集了我国华南地区的12株大蕉枯萎病病原菌及19株包括1号及4号生理小种的单孢菌株,以来源于澳大利亚的1号、2号、3号和亚热带4号生理小种以及4株非病原尖孢镰孢菌作对照,通过病原菌形态鉴定、致病性测定、4号小种(Foc 4)及热带4号小种(TR4)的分子特异检测、以及基于翻译延伸因子(TEF-1α)序列的系统发育分析,对大蕉枯萎病病原菌进行鉴定。同时,对我国华南地区不同来源的香蕉枯萎病病原菌的遗传发育关系及致病性分化情况进行了研究。结果表明:(1)引起大蕉枯萎病的病原菌主要是1号生理小种或者是与1号生理小种亲缘关系较近的一个新的系统发育谱系,该谱系可能为 1 号生理小种变异演化而来;(2)大蕉枯萎病病原菌对大蕉和粉蕉都有较强的致病力,但不能侵染香蕉;我国的1号小种存在一定的分化,其中有一个类群只能感染粉蕉,另一个类群既能感染粉蕉也能感染大蕉;(3)大蕉与粉蕉枯萎病的病原菌在致病性及遗传发育关系上都存在一定的交叉和分化。

以菜心品种为材料,设置不同浓度对羟基苯甲酸(pHBA)处理,并通过人工接种炭疽病菌,研究pHBA对菜心炭疽病的诱导抗性作用机理。结果表明,在菜心生长发育过程中根系可以分泌出pHBA。pHBA对菜心的生长、产量形成和炭疽病的发生有明显的影响。适宜浓度的pHBA处理可促进菜心生长,提高植株对炭疽病的抗性,显著地降低病情指数(DI),提高菜薹产量,但当pHBA积累到一定浓度时,就对菜心植株产生自毒作用,提高DI和降低菜薹产量。炭疽病菌的感染破坏了植株细胞膜,增强细胞膜透性水平,诱导产生病程相关蛋白(几丁质酶、β-1,3-葡聚糖酶)和细胞壁物质(木质素、富含羟脯氨酸糖蛋白(HRGP))。适宜浓度的pHBA处理可抑制炭疽病菌对细胞膜透性的伤害,加强诱导提高几丁质酶活性、β-1,3-葡聚糖酶活性、木质素含量和HRGP含量,引起细胞壁木质化加强,增加了菜心植株对炭疽病的诱导抗病能力,从而阻止病原菌进一步侵入和扩散,抑制炭疽病菌对菜心产量造成的损失。

通过对Xcc 8004菌株的hrp基因进行逐一敲除,系统研究单个hrp基因对Xcc致病性的贡献。结果表明,9个hrc (hypersensitive response and conserved)基因单独突变后在满身红萝卜上的致病性和在辣椒ECW-10R上激发HR的能力完全丧失;9个hrp基因中,hrpW突变后在辣椒ECW-10R上仍能产生HR,满身红萝卜上致病性减弱,其余hrp基因突变后致病性和过敏反应均丧失;4个hpa (hrp associated protein)基因突变后,hpaA和hpaB突变体完全丧失在满身红萝卜上的毒性也不能在辣椒ECW-10R上引起HR,hpa1和hpaP突变后致病性和HR显著减弱。另外,通过RT-PCR对Xcc 8004 hrp基因簇的每个基因受hrpX和hrpG的调控情况进行分析,结果表明所有hrp基因在不同程度上都受到hrpG、hrpX的正向调控。

为探明香蕉枯萎病菌侵染香蕉根系的过程，利用绿色荧光蛋白标记的香蕉枯萎病菌4号生理小种（Fusarium oxysporum f. sp. cubense race 4 tagged with green fluorescent protein，GFP-FOC4），接种香蕉根系以观察病原菌侵染香蕉根系的组织学过程。结果表明，接种1 d后病原菌以菌丝体、大型分生孢子和小型分生孢子的形式附着于根系表皮细胞，优先沿细胞胞间层生长。接种7 d后，观察到病原菌以菌丝体、大型分生孢子和小型分生孢子的形式直接侵染维管束，在维管束内以两种方式扩展繁殖，一种在维管束内横向扩展，菌丝体随机分支，逐步形成网状分布；另一种是菌丝体在维管束内纵向生长，倾向于呈束状沿维管束单侧生长繁殖，形成大量菌丝体。本研究首次从组织病理学的角度观察并分析了GFP-FOC4侵染香蕉根系的过程，为研究香蕉枯萎病菌的致病过程机理提供参考。

以抗稻瘟病水稻近等基因系C101LAC及CO39为材料，应用差异蛋白组学技术对外源茉莉酸甲酯（MeJA）诱导8 h和12 h后的水稻叶片蛋白质差异表达变化进行了分析。采用PEG4000预沉淀法提取水稻叶片总蛋白，经双向电泳、凝胶染色和图像分析，结果表明：与对照相比MeJA处理后的2个水稻品系中共有21个蛋白质表现为2倍以上的表达差异。其中，MeJA处理8 h后，CO39中的差异表达蛋白质点有5个，C101LAC中有8个，U5为2个品系中均新增的蛋白质点。MeJA处理12 h后，CO39中有6个差异表达蛋白质点，C101LAC中则有5个。经胶内酶解、MALDITOF/TOF质谱分析及数据库检索，成功对21个差异表达蛋白质进行了鉴定，其中新增的蛋白质点U5被鉴定为内切β1,31,4葡聚糖酶。依据GO数据库和UniProtKB数据库提供的蛋白质注释信息，按照功能可将21个差异表达蛋白质分为8类，分别在植物抗性、氨基酸代谢、信号转导、光合作用、光呼吸、糖代谢、蛋白质合成与分解及细胞代谢等方面发挥作用。

植物类病变突变体是一类在没有病原物侵染情况下就能自发产生坏死斑的突变体，这类突变往往导致植株的抗病增强和防御相关基因的组成性表达。水稻中已报道了将近200个来源不同的类病变突变体，截至2009年5月底52个水稻类病变突变体已被鉴定和命名，其中6个控制类病变性状的基因被克隆，它们分别编码不同的蛋白，包括热激蛋白转录因子、E3泛素连接酶、酰基转移酶、质膜蛋白激酶、锌指蛋白和锚蛋白。尽管这些蛋白不是直接与植物抗病途径相关，但是在41个已鉴定的水稻类病变突变体中，绝大多数提高了对白叶枯病或稻瘟病的抗性，表明这些类病变基因的突变激活了植株的防御系统，并且不同的类病变基因可能参与了不同的抗病信号传导途径。深入研究水稻类病变突变体对作物抗病的分子机理研究和栽培品种的遗传改良都具有重要的意义。 

为明确甘肃马铃薯镰刀菌干腐病的优势病原,2006 年12 月~ 2007 年3 月由西至东从甘肃张掖、天祝、永登、临洮、渭源和西和等6 县市的马铃薯贮藏窖中采集表现有镰刀菌干腐病症状的马铃薯薯块,以组织分离法分离病原,单孢纯化镰刀菌(Fusarium spp. )菌株后,以形态学为基础,参照Nelson 镰刀菌分类系统进行鉴定。结果表明:6 个采样区共分离到293株镰刀菌菌株,其中以接骨木镰刀菌(F. sambucinum)和茄病镰刀菌(F. solani)出现频率高,是优势种。分析发现第一优势种随采样区而异,张掖、天祝和渭源采集的样品中茄病镰刀菌分离频率分别为42. 6% 、42. 1% 和32. 4% ,接骨木镰刀菌分离频率分别为14. 8% 、5. 3% 和26. 5% ,茄病镰刀菌为第一优势种;永登、临洮和西和采集的样品中接骨木镰刀菌分离频率分别为52郾1% 、50. 9% 和55. 2% ,茄病镰刀菌的分离频率分别为23. 3% 、32. 7% 和20. 7% ,接骨木镰刀菌为第一优势种。本文进一步对其在PDA、CLA 上的培养特征进行了观察和描述。按照柯赫氏法则用混合菌株接种法对大西洋(Atlantic)、夏波蒂(Shepody)以及一地方品种进行致病性测定,证实了优势菌种对块茎的致病性。利用EF鄄1琢基因引物(EF鄄1H 和EF鄄2T)对接骨木镰刀菌菌株GAUF鄄F12 进行基因组DNA 的PCR 扩增,将PCR 产物回收测序后在GenBank 上比对,菌株GAUF鄄F12 与GenBank 登记的接骨木镰刀菌5 个菌株的同源性均达99% ;用DNASTAR 分析软件将同源性较高的登记菌株的序列与GAUF鄄F12 菌株构建同源性树,结果表明:该菌株与以上5 个接骨木镰刀菌菌株均位于同源性树的同一分支,聚为一类,与形态学的鉴定结果一致。

对品种多样性控制小麦白粉病的效果以及对产量和蛋白质的影响进行了研究，为利用品种多样性控制白粉病提供理论依据和技术支持。采用SSR技术分析5个小麦品种的亲缘关系；2008年和2009年按组合所含品种数为2、3、4和5个进行组合，在田间种植混种组合和单播小区，人工接种白粉菌，比较各小区中小麦白粉病的AUDPC值、产量和蛋白质变化。结果表明，5个品种亲缘关系相对较近；2个品种混合时以抗感搭配较好，随着抗病品种比例增加控病效果增强；2008年混合种植中有防治效果的组合占54.55%，相对防效为10.02%~47.58%，2009年有防治效果的组合占23.08%，相对防效在1.85% 到18.96 % 之间；在适当的组合中，如京冬8号/轮选987、京双16/京411/京冬8号对小麦白粉病有控制效果，混种不会影响产量和蛋白质含量；当有大量能克服本地品种抗性的外来菌源时混合种植的控病效果降低。品种多样性可以用做防治小麦白粉病的一项措施。

大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)和黑白轮枝菌（V. albo-atrum）在世界范围内引起多种作物的黄萎病，属于我国重要进境植物检疫对象。本研究对采自我国部分地区和CBS保存的多种植物病原性轮枝菌，包括黑白轮枝菌、大丽轮枝菌及其变种大丽轮枝菌长孢变种(V. dahliae var. longisporum)、三体轮枝菌(V. tricorpus)、变黑轮枝菌(V. nigrescens)和云状轮枝菌(V. nubilum)，采用生物学特性观察，结合rDNA-ITS序列分析的方法，进行了比较和分析。结果表明：不同种类轮枝菌在休眠结构形态上具有一定差异，部分菌株不产生任何休眠结构。各供试菌株在15～25℃范围内均可生长，但黑白轮枝菌在30℃下生长受到强烈抑制，而其他菌株受影响较小。对供试菌株rDNA-ITS序列分析结果表明植物病原性轮枝菌可聚为9个分支，包括三体轮枝菌、变黑轮枝菌、云状轮枝菌、V. theobromae、大丽轮枝菌、大丽轮枝菌长孢变种和3个不同的黑白轮枝菌分支，黑白轮枝菌、大丽轮枝菌及其长孢变种亲缘关系较近。采用生物学性状结合rDNA-ITS序列分析能够更加有效地将两种检疫性轮枝菌从其他植物病原性轮枝菌中区分出来。

镰刀菌产生的脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)污染小麦后对人畜具有较大的毒害作用。为明确DON毒素在小麦籽粒中的积累数量及其与镰刀菌菌株、接菌数量、小麦品种和病害严重度的关系,试验采用单花滴注方法在5个抗病性不同的小麦品种上分别接种9 个禾谷镰刀菌菌株,每个菌株接种1 × 106 、1 × 105 和1 × 104 个/ mL 3 个分生孢子浓度,并利用ELISA 法测定收获麦粒中DON 毒素含量。结果表明,麦粒中DON 毒素含量差异主要是由于不同禾谷镰刀菌菌株产生毒素能力不同所致。接种菌株8003、4020 的所有麦粒中DON 毒素含量均显著高于相同条件下接种其他7 个菌株的小麦。当接种产毒素能力强的菌株时,小麦抗病品种表现出在一定程度上降低DON 毒素积累的能力。不同接菌浓度对小麦赤霉病的发病程度和麦粒中DON 毒素含量有显著影响,在相同条件下,接菌浓度越高,病害严重度越高,DON 毒素含量也越高;反之,接菌浓度越低,病害严重度越低,DON 毒素含量也越低。

有活力但不可培养状态（Viable But Non-Culturable，VBNC）被认为是细菌对不良环境条件的一种抗逆反应，包括5种植物病原细菌在内的数十种细菌已报道具有VBNC状态。这种特定的生理状态已经导致细菌学研究中一些方法的探索和改进，对基于分离培养的植物病原细菌学研究产生了重大影响。本文对已经报道VBNC状态的植物病原细菌进行了综述，介绍了VBNC状态细菌的诱导因素、恢复条件、致病性、检测方法等方面的研究进展，对未来植物病原细菌的VBNC研究提出了展望。

银白杨,杨属植物,广泛种植于中国东北部地区,其锈病发生特别严重。在本研究中,根据形态特征和生活史将白杨锈菌鉴定为Melampsora laricis。使用杨树锈病叶片上的担孢子对日本落叶松及白山落叶松进行接种试验,结果证实了其精子器和锈子器世代发生在落叶松植物上。

ABC转运蛋白在真菌的致病性方面起着重要的作用。本研究查找和分析了稻瘟病菌基因组中47个ABC转运蛋白基因的外显子区、内含子区、5′-UTR和3′-UTR区中的SSR，并对编码区中SSR的扩张或收缩对蛋白结构的影响进行了预测。结果表明，SSR在这些基因的调控区和编码区分布不均一，且在基因的外显子区、内含子区、5′-UTR和3′-UTR区中SSR的组成和分布均不相同；基因的编码区中三碱基和六碱基SSR相对较多，SSR的基序大都表现为GC含量较高，编码的亲水性氨基酸出现频率远远高于疏水性氨基酸。根据稻瘟病菌自然群体中SSR的变化幅度，预测了SSR的扩张或收缩对蛋白二级结构的影响，发现SSR的扩张或收缩都可能对蛋白的结构产生影响。暗示着SSR的变异在致病相关基因的变异中可能扮演着重要角色。

Three to five months old Fuji apple branches were inoculated with conidia or mycelium of Botryosphaeria dothidea. Barks were sampled around lenticels or tumors from the inoculated and naturally diseased branches. The samples were cut with freezing microtomy and microanatomy conformations of tumors were examined with the microtome-sections. Observation results showed that newly formed tumors could be found just under lenticels from the branches 30 days after inoculation. The mycelia grew and expanded radially from the lenticels and the hyphae in tumors were thick and strong with circular or truncated end. All hyphae in deve-loped tumors were surround with several layers suberized host cells. The suberized cells stretched out, arranged in rings and enclosed the hyphae. A suberous layer, constructed of several layers of suberized host cells and expanded from epidermal cells, could be found just around the tumor in later stage of tumor development. The results suggested that B. dothidea infection stimulated the production of new host phloem cells and the cell suberization. The new produced cells together with the mycelia formed the tumors. The suberous layer separated the tumor tissue from health host cell and resulted in necrosis of tumor and surrounded tissues. The edge of the necrotic tumor was then lift, like saddle next year and finally peeled off. The observation suggested that tumor forming and peeling were the results of host defending reaction to the pathogen.

对湖南省百合生长期鳞茎腐烂病的病原至今未见报道。受隆回县科技局委托，我们对该县鳞茎腐烂病病原进行了形态学和分子生物学鉴定。研究结果为该病害的防治奠定了基础。

肾形肾状线虫（Rotylenchulus reniformis）是一种重要的蔬菜线虫，寄主范围和分布很广。本文根据形态学特征和形态测量将来自浙江省杭州市蔬菜上的肾状线虫群体鉴定为肾形肾状线虫，为浙江省首次报道。该群体的形态学特征及形态测量值与模式标本基本吻合，个别形态测量值(比值)有变异。通过对该肾形肾状线虫群体的rDNA中ITS区和编码28S RNA基因中的D2D3区的PCR扩增和序列测定，明确二序列长度分别为808 bp和786 bp；序列分析发现该群体ITS序列与肾形肾状线虫种内一些两性生殖群体的亲缘关系较近，同源性高达99.5%～100%，而与一孤雌生殖群体同源性为92.4%；编码28S RNA基因中的D2D3区与已报道群体的同源性达到99.4%，相似度较高；本研究还发现杭州肾形肾状线虫群体的寄主涉及11个科16个属的果蔬。

2006年以来广东省主要甘薯产区发现1种甘薯新病害，主要症状表现为叶片变黄，茎基部呈黑色水浸状腐烂，并逐渐沿茎枝向顶端腐烂，后整株倒伏、死亡。从甘薯病茎部分离得到了病菌，经柯赫法则验证为致病病原菌。根据病原菌的形态特征、培养性状、生理生化及16S rDNA序列分析，鉴定其为菊欧文氏菌(<i>Erwinia chrysanthemi</i>)。采用茎枝、菌液共培养法接种8个甘薯品种，结果表明8个品种均无抗病性，病原菌致病性较强。这是我国首次发现该病害。 

The fungicide resistance of anthracnose in Camellia oleifera nurseries was investigated in Liuyang, Changning, and other regions in Hunan Province. The Colletotrichum gloeosporioides strains from the former two regions were highly resistant to carbendazim. After subcultured for 10 generations on fungicidefree medium, the resistant strains grew well on the medium containing carbendazim 450 μg/mL and suggesting that its resistance was stable. The βtubulin genes from the resistant and susceptible strains were cloned and sequenced.  The coding region was 1 344 bp nucleotides and predicted to encode a protein with 447 amino acids. Comparison of the βtubulin amino acid sequences between resistant and susceptible strains of Colletotrichum gloeosporioides revealed that a mutation leading to an amino acid substitution at the position 198 from glutamic acid in the susceptible strain to alanine in the resistant strain. Finally, the main morphological characteristics of C.gloeosporioides were descripted，but it could not be used to determine the resistance to carbendazim.

稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)引起的稻瘟病是水稻上的一种毁灭性真菌病害,每年导致的稻谷产量损失可养活6千万人口。从分子水平了解该病菌的致病机理,对新型药剂靶标的挖掘和病害防控策略的制定具有重要的理论和实践指导意义。生物体存在两类GTP结合蛋白,一类是异三聚体G蛋白,另一类是小G蛋白。小G蛋白分子量为20~30 KD,具有GTP酶活性,在多种细胞反应中具有分子开关作用。小G蛋白结合GTP时被激活,可作用于下游分子使之活化。当GTP水解成为GDP时,则恢复为非活化状态。细胞中存在一些专门控制小G蛋白活性的调节因子,如鸟嘌呤核苷酸交换因子(guanine nucleotide exchange factor,GEF)和GTP酶激活蛋白(GTPase activating protein, GAP)。GEF能够催化GTP的转换,而GAP的作用是加速GTP的水解,使小G蛋白向失活的状态转变。本研究在稻瘟病菌中鉴定到一个GAP蛋白MoGcs1,并对该蛋白编码基因的生物学功能进行了研究。对MoGCS1基因进行敲除突变发现,ΔMogcs1突变体产孢量显著下降,分生孢子形态异常,且附着胞形成加快,但突变体的营养生长和致病能力与野生型比较无明显变化。进一步研究发现,突变体对外界盐胁迫敏感性升高,对细胞壁胁迫敏感性降低。上述结果表明,MoGcs1是稻瘟病菌生长发育过程中一个重要的蛋白,参与调控病菌的无性繁殖、附着胞分化及对外界胁迫的应答。

为从分子水平上明确小麦赤霉病流行区镰刀菌致病种及其B 型毒素化学型的分布特点,本研究对2008 年度采自四川、重庆、湖北、安徽、江苏、河南6 省33 县市的赤霉病穗上分离获得的433 个镰刀菌单孢菌株,用鉴定种和鉴定B 型毒素化学型的特异性引物进行了鉴定分析。致病种检测结果表明,四川病穗检测到Fusarium asiaticum、F. graminearum、F.avenaceum 和F. meridionale 4 个镰刀菌种,重庆、湖北、安徽和江苏病穗检测到F. asiaticum 和F. graminearum 2 个种,河南病穗仅检测到F. graminearum 1 个种。毒素化学型检测结果表明,Nivalenol(NIV)是四川和重庆镰刀菌主要毒素化学型,Deoxynivalenol(DON)是湖北、河南、安徽和江苏镰刀菌主要毒素化学型;将DON 化学型进一步划分为3-AcDON 和15-AcDON 显示,四川、湖北、江苏镰刀菌毒素以3-AcDON 为主,安徽镰刀菌毒素为3-AcDON 和15-AcDON 两者参半,河南镰刀菌全部产生15-AcDON。结果揭示,F. asiaticum 是四川、重庆、湖北和江苏等赤霉病流行麦区的优势致病种;镰刀菌产生的DON 和NIV 毒素化学型存在明显的地域分布,长江上游的麦区以NIV 为优势化学型,长江中下游麦区以DON 为优势化学型;镰刀菌致病种与DON 毒素的化学型间存在一定关系。

越橘为杜鹃花科 (Ericaceae) 越橘属 (Vaccinium) 小浆果类果树，其中的蓝果类型俗称“蓝莓”。自21 世纪以来，蓝莓这一新兴果树在中国开始了大面积的产业化生产栽培，据统计，到2008年，全国超过10个省份开始了商业化栽培，总栽培面积由2000年的24 hm2快速发展到2 000 hm2，预计未来10年内将超过10万 hm2。随着生产面积的不断扩大，各种病虫害的危害以及如何进行有效防治的问题显得越来越突出。然而，我国对蓝莓病虫害的研究很少，病虫害对于蓝莓产业发展的潜在威胁随着栽培面积的迅速增加而增大［1］。蓝莓枝干溃疡病是近年来在我国辽宁地区发生的一种为害严重的新病害。国外许多学者曾对蓝莓枝干溃疡病进行过研究报道，明确Botryosphaeria属真菌为该病病原，并对其病原学、致病性及发生流行规律进行了大量研究［2，3］，而我国尚未见相关研究报道。据此，作者采集病害枝干样品，分离获得病原菌，通过致病性测定、病原菌培养特性观察并结合分子生物学研究，旨在明确该病害的症状、病原菌种类，为其防治提供理论依据。

Rice samples showing symptoms similar to the disease caused by Southern rice black streaked dwarf virus (SRBSDV, Genus Fijivirus, Family Reoviridae) collected from three municipalities of southern Yunnan were detected by electron microscopy and RT-PCR. Electron microscopy observation of crude infected leaf extracts after negative staining revealed spherical particles of 70-75 nm, and about 411 bp fragment of RT-PCR shared 97.6%-100% nucleotide identities with reported capsid protein gene of SRBSDV isolates. The phylogenetic tree based on the partial capsid protein gene sequences indicated that the virus causing rice dwarf in Yunnan should be identified as SRBSDV.

在硅胶柱层析获得暗孢节菱孢菌（Arthrinium phaeospermum）非蛋白毒素基础上，以浸渍法进行生测和叶圆片法分析不同浓度毒素对撑×绿杂交竹（Bambusa pervariabilis×Dendrocalamopisis grandis hybrid bamboo）叶组织细胞膜透性、可溶性蛋白、可溶性糖、丙二醛（MDA）、游离脯氨酸（Pro）含量及过氧化物酶（POD）、过氧化物歧化酶（SOD）和苯丙氨酸解氨酶（PAL）活性的影响。结果表明：暗孢节菱孢菌毒素可使杂交竹呈现典型症状，且使细胞膜透性和MDA含量显著提高。在较低毒素浓度范围内，毒素与杂交竹体内的游离脯氨酸含量、防御酶活性呈正相关，与可溶性糖负相关；而当浓度较高时，毒素与游离脯氨酸含量以及防御酶活性呈负相关，这说明高浓度毒素能使杂交竹机体组织完全破坏，从而证明了毒素在暗孢节菱孢菌对杂交竹致病过程中起重要作用。

蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)B3-7 是一株对于小麦全蚀病具有有效生防作用的小麦内生细菌。为了研究B3-7 在小麦根内的定殖机制,本研究将含有转座子TnYLB-1 和温度敏感型复制子的质粒pMarB 转化B3-7 菌株,高温处理后TnYLB-1 插入细菌基因组中,构建转座子插入突变体库。通过筛选,获得1 株在小麦根内定殖能力显著降低的突变体B3-7-458。利用反向PCR 方法分离转座子插入位点的侧翼序列并分析其特征,发现转座子插入导致细菌鞭毛运动性相关基因mota 失活,同时发现mota 失活菌株对于小麦全蚀病的生防能力降低。通过构建互补载体对突变基因mota 进行互补分析,发现互补菌株的运动性、在小麦根系内部的定殖能力以及对于小麦全蚀病的生防能力得以恢复。本研究证明了生防菌蜡样芽孢杆菌B3-7 的mota 基因参与该菌株在小麦根系的内生定殖,也参与了该菌株对于小麦全蚀病的生物防治。

本研究以番茄抗病品种05046与感病品种051355配制杂交组合，接种鉴定F1代及F2代分离群体的黄萎病发生情况，结果表明，番茄黄萎病属单基因显性遗传。用545对AFLP引物和101对SSR引物对两个亲本、抗感池及F2代分离群体进行AFLP和SSR分析，得到3个与番茄抗黄萎病基因Ve连锁的AFLP标记和1个SSR标记，分别是E66M84-A、E78M84-D、E66M40-A和SSR599，与抗病基因Ve的连锁遗传距离分别为10.3、14.2、30.5 和12.5 cM。

Sweet potato virus disease(SPVD), the most important viral disease of sweet potato, is caused by the synergistic interaction between Sweet potato feathery mottle virus (SPFMV) and Sweet potato chlorotic stunt virus (SPCSV). During 2009 and 2010, vine cuttings with typical SPVD symptoms were collected from Jiangsu, Anhui, Guangdong and Sichuan Provinces to be tested for the presence of SPCSV and SPFMV. NCM-ELISA testing indicated that three samples reacted positively with SPFMV and SPCSV antiserum simultaneously. Reverse-transcription (RT)-PCR and nucleotide sequencing showed that total 10 samples were infected by both SPFMV and SPCSV. Graft transmission experiments were done by side graft. Transmissions of SPVD by grafting to virus-free sweet potato plants was achieved easily, and developed typical symptoms 30 days after graft inoculation. SPCSV and SPFMV can be detected from the diseased sweet potato plants by grafts. To our knowledge, this is the first report of SPVD in China.

自2007 年起重庆万州的红橘(Citrus reticulata Blanco, CV. Hongjv)上爆发一种未曾见过的病害,损失严重,因病斑褐色,故被称之为褐斑病。褐斑病贯穿柑橘整个生长季节,主要为害叶片和果实,严重时也为害新梢,引起大量落叶和落果,甚至枝梢枯死。为明确其病原,本研究从病区多个果园采集发病的叶片、果实和枝梢,检查和分离培养发现病组织中广泛存在链格孢菌(Alternaria)和炭疽菌(Colletotrichum)。致病性试验证明只有链格孢菌才能引起类似褐斑症状,而炭疽菌和空白对照都不产生任何症状。通过比较研究这些链格孢菌菌株的形态学,培养性状和多聚半乳糖醛酸酶(endoPG)基因的部分序列,可以断定红橘褐斑病的病原为交链格孢菌[A. alternate (Fr. ) Keissler]。病原性质的确定将为红橘褐斑病发生规律的研究和控制奠定基础。

数据统计分析不充分或不正确,是导致中国科研工作者在国际期刊投稿中遭拒的主要原因之一。过去20年,统计方法学及计算机软件在统计应用方面已有重大进展。但是,大多数中国植物病理学家仍然使用传统的方差分析或普通的分析方法去分析一些数据,而这些数据其实可用更合适的方法分析。本文简要介绍一些适于植物病理学常见数据的统计分析方法,希望对广大科研工作者有所帮助,也希望加强与应用统计学家的科研合作。

An one-step dual RT-PCR method was developed for Southern rice black-streaked dwarf virus (SRBSDV) detection from host plants and insect vector white-backed planthopper (Sogatella furcifera Horvath,Hemiptera: Delphacidae), from which two cDNA fragments of the viral genome S5 and S10 were amplified
simultaneously. Two primer pairs, S5-F1 / S5-R2 (5′-ttacaactggagaagcattaacacg-3′ / 5′-atgaggtattgcgtaactgagcc -3′) and S10-oF / S10-oR(5cgcgtcatctcaaactacag -3′ / 5′-tttgtcagcatctaaagcgc -3′), were selectedfrom 40 primer pairs based on SRBSDV genome sequences, and amplified viral S5 ORF1 fragment (819 bp) and cp gene fragment ( 682 bp), respectively. Using total RNA extracts from infected plant leaf tissue or individual planthopper adult as templates, one step RT-PCR reaction in the conditions of annealing temperature of 53℃ with the final concentrations of 240 nmol / L S5-F1 / S5-R2 and 120 nmol / L S10-oF / S10-oR generated a similar yield of two amplicons in argrose electrophoresis analysis. Sequence analysis confirmed the correct
result of the amplification. Additionally, several commercal RNA extraction kits was proven to be fit for the template preparation, and the protocol for total RNA extraction from plant leaf tissue and individual planthopper was simplified by sample grinding direct in eppendorf tube. This method can be used for SRBSDV detection of dried or 70% alcochol soaked planthopper samples stored over one month in room temprature. Key words: Southern rice black-streaked dwarf virus; Sogatella furcifera Horvath

广东口岸从美国华盛顿输华苹果（Malus domestica）中截获可疑腐烂病果, 症状表现为果梗凹腐或萼凹腐，病部果皮暗褐色至黑色，病健交界处纹带褐色，分生孢子器黑色、颗粒状，直径0.3~0.8 mm，部分埋生或近表生, 显微镜检可见无色单胞的分生孢子。分离物生长温度-3~25℃, 最适为20℃, 经柯赫氏法则验证确认为截获病果的病原菌。Blast分析表明从分离物基因组中扩增到的ITS基因与GenBank中已知的Phacidiopycnis washingtonensis菌株ITS序列同源性达100%。经形态特征、培养性状及ITS系统发育分析, 将病原菌鉴定为苹果星裂壳孢果腐病菌（Ph. washingtonensis Xiao& J.D.Ro-gers，2005），在分类上隶属于半知菌亚门球壳孢目星裂壳孢属(Phacidiopycnis)，此截获鉴定属我国首次。迄今为止我国尚未有该病菌发生为害的报道，本文就此病菌对我国苹果和梨产业的潜在风险进行了评估分析。

采用双向电泳联用MOLDI-TOF-TOF质谱对水稻感病品种武育粳3号和抗病品种KT95-418感染水稻条纹病毒（Rice stripe virus，RSV）前后的叶片进行蛋白质组学分析。结果显示，RSV基因组编码的病害特异蛋白（disease specific protein，SP）在武育粳3号中的积累量明显高于KT95-418中。其他25个蛋白经质谱成功鉴定，包括RSV NS2蛋白，寄主中与光合作用、细胞氧化还原状态和离子平衡状态及蛋白的合成、转运与翻译后修饰等相关的蛋白。对这些差异表达的蛋白与水稻感、抗病的作用进行了分析。

利用苯并噻二唑BTH处理菌核病抗性不同的花椰菜品种幼苗, 采用营养生长期活体叶片菌丝块接种鉴定法评价菌核病抗性诱导效果，结果表明经BTH处理的植株菌核病病情指数明显下降, 对感病品种和抗病品种的诱抗效果分别达到81.5%和63.8%。对于花椰菜重要的防御酶活性变化研究结果表明，BTH诱导处理的花椰菜植株过氧化物酶（POD）、抗坏血酸酶( SOD )、过氧化氢酶（CAT）、苯丙氨酸解氨酶（PAL）和多酚氧化酶( PPO)的活性均有所提高。同时病程相关蛋白几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶的活性也增加。 利用半定量RT-PCR方法检测防御反应基因表达，结果表明BTH诱导首先激发了植株 PR-1等基因参与的水杨酸信号传导防御反应途径的发生，同时PDF1.2 基因的上调表达说明BTH诱导也影响了茉莉酸信号传导途径。

水稻白叶枯病菌（Xanthomonas oryzae pv. oryzae, Xoo）和条斑病菌（Xanthomonas oryzae pv. oryzicola, Xoc）是水稻上的模式病原菌，分别引起水稻白叶枯病（bacterial blight, BB）和细菌性条斑病（bacterial leaf streak, BLS）。为了精确和高效地实现目的基因的突变，本研究利用pK18mobGⅡ载体，建立了一套适于Xoo和Xoc目的基因定点插入的突变体系。通过同源片段与目的基因间的同源重组，成功获得了Xoo和Xoc的hrcV和hrpF突变体。PCR和Southern杂交证实：pK18mobGⅡ携带不同大小的同源片段，能够整合于hrcV和hrpF的特定位点；200～400 bp的同源片段能够获得最佳的突变效率；两亲接合的转化效率是电转化的5～100倍。毒性测定结果显示，hrcV基因决定着Xoo在水稻上的致病性。致病相关基因插入突变体系的建立为研究水稻黄单胞菌与水稻互作中致病相关基因的功能奠定了遗传学研究基础。

In September of 2009, watermelons stored in low temperature conditions for 7 days were rotted and caused above 90% losses in Kaifeng. The fungus was isolated from diseased tissues and the morphological characteristics, pathogenicity and DNA sequence of 5. 8S rDNA-ITS were studied. The fungus was identified as Colletotrichum orbiculare based on the morphological characteristics. DNA sequence of 5. 8S rDNA-ITS of the isolate was 100% homologous with the other 5. 8S rDNA-ITS sequences of C. orbiculare in GenBank. In-oculated watermelon with this isolate could produce the same symptoms as naturally infected plants. Reisola-tion of the fungus from lesions on inoculated fruit confirmed that the causal agent was C. orbiculare which caused watermelon rot during the storage period.

小麦-簇毛麦6VS. 6AL 易位染色体含有抗白粉病基因Pm21,在我国的小麦育种中被广泛应用。近年来,一些含有Pm21 基因的小麦品种(系)开始感染白粉病。为探索含Pm21 的品种(系)感染白粉病的原因,本研究在6VS. 6AL 易位系与小麦品系(种)R14 和川农12 的杂交后代中利用分子标记CINAU17-1086 和CINAU18-723 辅助选择的遗传背景相对简单的F7 和F8 近等基因系为材料,研究了小麦抗白粉病基因Pm21 的抗病性表达。结果发现,在3 个含有6VS. 6AL 易位染色体的感病F6 植株繁殖的F7 近等基因系中发生了白粉病抗性的分离,分离比率符合13 感病︰ 3 抗病的理论值。在随机选取的F7 感病小麦单株所繁殖的F8 近等基因系中,有7 / 13 的株系一致地重感白粉病,有6 / 13 的株系发生了抗白粉病的分离,其中2 / 13 的株系分离比符合3 感病︰ 1 抗病、4 / 13 的株系分离比符合13 感病︰ 3 抗病的分离模式。这一结果指出,小麦株系中的抗白粉病基因Pm21 的抗性表达受小麦基因组中的一对显性抑制基因所控制,该基因来源于小麦品种(系)川农12或R14,建议命名为SuPm21。本研究指出,在把外源基因引入小麦的研究中,有利的外源基因与不含抑制基因的受体遗传资源同等重要。

贵农22 是由簇毛麦、硬粒小麦以及普通小麦杂交选育而成的普通小麦品种,其对我国目前所有已知条锈菌生理小种均表现高度抗病。为了明确其抗条锈性遗传基础,并对抗条锈基因进行分子作图,本研究选用条锈菌重要小种CYR29、CYR30、CYR32、CYR33 和Su11鄄11,对贵农22 与条锈病感病品种辉县红或铭贤169 杂交F2 代、BC1 F1 代、BC1 F2 代进行抗锈性遗传分析,并对贵农22 控制Su11鄄11 抗病性的1 对隐性基因进行SSR 标记。结果表明,贵农22 至少含有3 对抗条锈病基因。利用272 株贵农22 / 铭贤169 BC1 F2 群体筛选到2 个与贵农22 控制Su11鄄11 抗性的隐性基因连锁的SSR 标记Xwmc44 和Xcfa2147,遗传距离分别为5. 1 和7. 3 cM,并将抗病基因定位于小麦1BL 上,暂命名为YrGn22。基因来源、抗病性分析以及分子检测结果表明,YrGn22 不同于1BL 上的已知小麦抗条锈病基因Yr3、Yr9、Yr21 和Yr29,可能是1 个新基因。

One serious disease happened on the fruit of Chinese Dwarf Cherry in Liaoning Province recently. The typical symptom was brown spot formed on the fruit surface. The spot spread quickly through the whole fruits, then the fruits were rotten. There were tomentum round shaped mildew formed on the surface of sym-ptomaticfruits. The pathogen was isolated from infected fruits. After pathogenicity tests in lab and field and re-isolation, the isolate H1 was determined to be responsible for the disease. H1 colony on PDA was 70-75 mm in diameter, with concentric rings in grayish or light brown color after 7 days incubation at 22℃ with illumination of 12 h near-UV/12 h dark. The conidia were one-celled, hyaline, lemon-shaped, （10-27） μm×（7-17） μm on PDA, produced in branched monilioid chains. The rDNA ITS sequence of islolates H1 and G1 had 100% similarity with those of Monilinia fructicola in GenBank. The amplification results with three Monilinia specific primer pairs showed that only primer pair ITS1Mfcl and ITS4Mfcl could amplify a 356 bp fragment. Based on the morphological characteristics and rDNA molecular analysis, the pathogen was finally identified as M. fructicola.

稻瘟病菌无毒基因AvrPiz-t编码了一个包含108个氨基酸的未知功能的预测分泌蛋白，其与对应的水稻抗稻瘟病基因Piz-t介导了基因对基因的抗病反应。序列分析发现AvrPiz-t的预测成熟蛋白AvrPiz-t₉₀含有4个半胱氨酸残基，推测它们可能参与了AvrPiz-t蛋白分子内或分子间的相互作用。为了检测这4个半胱氨酸对AvrPiz-t功能的影响，利用定点突变技术对4个半胱氨酸残基分别进行了位点突变并构建了相应的稻瘟病菌互补载体。功能互补分析发现，上述4个突变体都丧失了AvrPiz-t无毒基因的功能。由此推断，半胱氨酸对AvrPiz-t蛋白功能的表达是非常重要的。