2022年, 第52卷, 第1期　刊出日期：2022-01-10

  

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病原学
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  我国主产区猕猴桃采后腐烂病病原多样性研究

  封露, 陈凡可, 林杨, 程家森, 谢甲涛, 付艳苹

  植物病理学报. 2022, 52(1): 1-8. https://doi.org/10.13926/j.cnki.apps.000739

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  猕猴桃采后腐烂在我国发生普遍。本试验对来自陕西、四川、湖北、山东和江西五省的773个猕猴桃病果进行组织分离,获得739个真菌分离株。经ITS序列比对及代表菌株的科赫式法则验证,确定其中722个菌株为猕猴桃采后腐烂病病原,属于以下11个属:Botryosphaeria、Diaporthe、Neofusicoccum、Alternaria、Botrytis、Fusarium、Cladosporium、Sclerotinia、Rhizopus、Lasiodiplodia和Pestalotiopsis。以Botryosphaeria dothidea和Diaporthe spp. 为优势种群,分别占总病原数的45.29%和45.15%。病原多样性分析显示,相同产区猕猴桃采后腐烂病病原种类相似。
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  广西蔗区甘蔗白条病菌的鉴定与致病力分析

  吴广悦, 李奕莎, 李美霖, 张桂英, 陈保善, 张木清

  植物病理学报. 2022, 52(1): 9-16. https://doi.org/10.13926/j.cnki.apps.000565

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  甘蔗白条病是一种检疫性病害,在我国多个蔗区均有报道,严重威胁我国甘蔗生产。本研究对采自广西蔗区不同品种(系)的病原菌进行分离、鉴定、保存,并选取其中40份白条黄单胞菌分离物进行遗传多样性分析与接种试验,评价其致病性。根据三磷酸腺苷结合盒转运蛋白等管家基因和IV型分泌系统virB基因的序列差异和进化树分析,将40个菌株分为两个类型;调查分析接种植株发病症状及病情指数,确定40份病原菌的致病力存在明显差异,致病力强的菌株有5个,中等4个,其他31个菌株表现弱致病力。
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  ChiVMV在滇重楼上的首次发现及部分基因序列分析

  杨洁, 马清遵, 孟鈺, 黄丹, 李晨荣, 何鹏, 李凡, 兰平秀, 谭冠林

  植物病理学报. 2022, 52(1): 17-24. https://doi.org/10.13926/j.cnki.apps.000573

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  滇重楼(Paris yunnanensis)是主要分布在我国西南地区尤其是云南的珍贵药材。2016年,从云南省德宏州芒市的滇重楼种植基地上观察到叶片斑驳、皱缩、坏死和花叶的滇重楼罹病植株。利用马铃薯Y病毒属(Potyvirus)、烟草花叶病毒属(Tobamovirus)、黄症病毒属(Luteovirus)和菜豆金色花叶病毒属(Begomovirus)病毒的通用引物和重楼X病毒(paris polyphylla virus X,PPVX)的特异引物,对采集的13份滇重楼样品进行病毒检测,结果发现利用马铃薯Y病毒属的通用引物CIFor/CIRev,能从罹病植株中扩增到与引物设计相符的条带。将目标产物克隆、测序,结果显示与辣椒脉斑驳病毒(chilli veinal mottle virus, ChiVMV)云南烟草分离物在ci基因核心区域具有99%的核苷酸序列一致性,表明染病滇重楼有ChiVMV的侵染。利用ChiVMV的特异引物,对2016—2018年采自云南省保山市龙陵县、德宏州芒市、怒江州泸水县、丽江市古城区、迪庆州香格里拉市和四川省攀枝花市盐边县的93份滇重楼样品进行RT-PCR检测,结果除泸水县采集的8个样品没有检测到ChiVMV外,其他5个地区采集的85个样品中有25个检测到ChiVMV的侵染。将ChiVMV丽江分离物及迪庆分离物的PCR产物进行克隆和测序,序列分析显示2个ChiVMV滇重楼分离物(YLJ-CL1,MW408193;YDQ-CL1,MW404246)在部分NIb基因及完整cp基因共1 269 nt的区域,具有相互间100%的核苷酸序列一致性,以及与ChiVMV其它分离物相应区域82.4%~99.1%的核苷酸序列一致性。利用不同ChiVMV分离物中该区域1 269 nt核苷酸序列构建的系统发育树,表明侵染滇重楼的ChiVMV分离物与侵染云南烟草的ChiVMV分离物亲缘关系最近。这是ChiVMV在重楼属(Paris)乃至黑药花科(Melanthiaceae)植物上的首次报道。
细胞生物学、生理学、生物化学、分子生物学
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  草莓多主棒孢霉小柱孢酮脱水酶基因CcSCD1的功能研究

  薛彩英, 武海燕, 侯梦圆, 马庆周, 郭雅双, 耿月华, 臧睿, 张猛, 徐超

  植物病理学报. 2022, 52(1): 25-36. https://doi.org/10.13926/j.cnki.apps.000562

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  多主棒孢霉(Corynespora cassiicola)是世界范围内重要的植物病原真菌,其引起的草莓棒孢霉叶斑病对草莓产业的健康发展具有潜在威胁。小柱孢酮脱水酶(scytalone dehydratase,SCD)是真菌多聚二羟萘类(DHN)黑色素生物合成途径中的关键酶,在植物病原菌致病过程中发挥重要作用。本研究通过同源重组的方法获得了草莓多主棒孢霉小柱孢酮脱水酶基因(CcSCD1)的敲除突变体,并进行了回补和RT-PCR验证。与野生型相比,敲除突变体△CcSCD1-2表现为菌落无色素沉积、菌丝稀疏、产孢量显著下降、分生孢子无色较小以及致病力明显减弱。结果表明,CcSCD1参与调控多主棒孢霉的黑色素生物合成、营养生长、分生孢子产量及致病力。
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  FpStuA参与假禾谷镰孢的产孢和致病性

  赵静雅, 凡卓, 彭梦雅, 夏荟清, 殷悦, 徐赛博, 孙纤缘, 周海峰, 李洪连, 陈琳琳

  植物病理学报. 2022, 52(1): 37-46. https://doi.org/10.13926/j.cnki.apps.000728

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  假禾谷镰孢是一种土传真菌,其引起的小麦茎基腐病已成为威胁我国小麦生产的重要病害。APSES蛋白是真菌中保守存在的一类转录因子,参与多种细胞生理过程。本研究,我们在假禾谷镰孢中鉴定到StuA同源蛋白FpStuA。qRT-PCR分析发现FpStuA在假禾谷镰孢分生孢子和侵染阶段诱导表达。通过PEG介导的原生质体转化方法获得3个FpStuA基因缺失的突变体。与假禾谷镰孢野生型菌株相比,Δfpstua突变体的生长速度明显减慢,气生菌丝减少;分生孢子的产生比野生型减少70%,且Δfpstua突变体分生孢子变短、分隔减少;Δfpstua突变体对大麦叶片、小麦胚芽鞘和小麦根的致病性均显著降低,脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)合成明显减少。综上结果,转录因子FpStuA对假禾谷镰孢的生长、产孢和致病性都非常重要。
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  猕猴桃溃疡病菌Ⅲ型效应蛋白HopAZ1功能研究与互作蛋白鉴定

  朱俏眉, 赵福, 袁金容, 龙友华, 樊荣, 李忠, 赵志博, 黄丽丽

  植物病理学报. 2022, 52(1): 47-60. https://doi.org/10.13926/j.cnki.apps.000737

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  细菌Ⅲ型分泌系统可向寄主植物细胞分泌多种效应蛋白,在丁香假单胞菌猕猴桃致病变种(Psa)侵染猕猴桃致病中发挥关键作用。但是,尚不清楚Psa如何利用这些效应蛋白与寄主互作。Psa的5个生物型群体具有不同种类的效应子,但其中共有的14个效应子可能是参与病菌与寄主亲和互作的关键因子。本研究系统调查了其中HopAZ1的功能。结果显示,HopAZ1广泛分布于丁香假单胞菌的不同类群,在Psa不同生物型群体遗传分化前已经存在,且可能由于在致病中具有重要功能而被纯化选择;HopAZ1在Psa侵染猕猴桃早期被诱导表达,敲除突变体对不同猕猴桃枝条的致病力均显著上升;进而通过构建猕猴桃酵母文库和酵母双杂交筛选,发现HopAZ1可能与猕猴桃抗病相关蛋白Cp1(Acc23383)、PR5(Acc28852)互作。这表明HopAZ1是Psa与猕猴桃互作的重要因子,可能通过与Cp1或PR5互作激发一定程度的抗病反应。这为深入解析HopAZ1的作用机制及猕猴桃抗病基因的挖掘提供了重要依据。
流行学与生态学
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  马铃薯疮痂病菌在植株和田间的分布与动态分析

  马丹丹, 关欢欢, 李寿如, 贾景丽, 于秀梅, 刘大群, 赵伟全

  植物病理学报. 2022, 52(1): 61-67. https://doi.org/10.13926/j.cnki.apps.000563

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  为探明马铃薯疮痂病菌在植株和土壤中的分布情况及种群动态变化特点,利用常规PCR和定量PCR(qPCR)技术对不同环境的马铃薯疮痂病株和田间植株不同生育期的土壤样品进行病原菌的定性定量检测。结果表明,病田、温室盆栽和微型薯苗床中马铃薯疮痂病重度发病植株的根、匍匐茎、块茎、地上茎、叶片等组织样品均可检测到184 bp的疮痂病菌特异性条带,健康植株相应组织均无该条带。病田/温室盆栽/微型薯苗床病株每克不同组织样品疮痂病原菌的孢子当量值分别为:叶片(7.63/8.06/20.49)×10³、地上茎(2.67/4.75/73.35)×10⁴、匍匐茎(56.84/3.78/79.88)×10⁵、块茎(1.67/2.60/43.47)×10⁷、根(2.51/51.79/8.31)×10⁵。在田间病圃中每克土壤疮痂病原菌的孢子当量值变化范围为:自由土(2.12~9.18)×10⁴、根际土(2.31~14.03)×10⁴,在块茎发病期间含量较高。病圃中马铃薯植株生长期间,对植株幼苗期、块茎形成初期、块茎发病期和马铃薯收获期的定量检测结果表明,每克组织疮痂病原菌的孢子当量值约为:叶部(4.62~23.76)×10³、地上茎(6.12~77.08)×10³、匍匐茎(2.75~4.57)×10⁴、根部(1.41~2.36)×10⁵、块茎3.43×10⁴~2.04×10⁷。本研究初步探明了疮痂病菌在马铃薯植株上的分布特征和田间土壤中的种群动态变化,为进一步研究病害的侵染机制和发生规律奠定了基础。
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  小西葫芦绿斑驳花叶病毒生物学特性及传播方式

  梁智玲, 刘美, 亓芳芳, 康保珊, 古勤生, 彭斌

  植物病理学报. 2022, 52(1): 68-76. https://doi.org/10.13926/j.cnki.apps.000570

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  小西葫芦绿斑驳花叶病毒(Zucchini green mottle mosaic virus, ZGMMV)是我国新报道的侵染葫芦科作物的烟草花叶病毒属病毒。从感染病毒的葫芦叶片中分离出ZGMMV,摩擦接种西瓜(Citrullus lanatus)、葫芦(Lagenaria siceraria)、西葫芦(Cucurbita pepo)、南瓜(Cucurbita moschata)、丝瓜(Luffa cylindrica)、黄瓜(Cucumis sativus)、甜瓜(Cucumis melo)、西方烟(Nicotiana occidentalis)、本生烟(Nicotiana benthamiana)和心叶烟(Nicotiana glutinosa),通过症状观察、血清学和分子生物学检测明确症状特点和寄主范围;研究病毒的种子传播,以及整枝打杈和滴灌对于病毒的传播。结果表明:ZGMMV可侵染所有供试植物;叶片症状主要为花叶、斑驳和褪绿斑,西瓜茎蔓出现坏死斑、果实倒瓤,甜瓜果实表皮出现褪绿斑;ZGMMV可通过整枝打杈等农事操作机械传播,也可通过滴灌的水在土壤中传播。该病毒在西瓜、葫芦和甜瓜上可以种传,种传率均约为1%。研究结果有助于制订该病害的综合防控策略。
植物病害及其防治
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  假禾谷镰孢子囊壳的田间采集和子囊孢子后代室内杂交条件优化

  谢顺培, 李海洋, 张宛莹, 王利民, 康瑞姣, 张媛, 汪敏, 袁虹霞, 丁胜利, 李洪连

  植物病理学报. 2022, 52(1): 77-85. https://doi.org/10.13926/j.cnki.apps.000742

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  假禾谷镰孢(Fusarium pseudograminearum,Fp)是我国黄淮麦区小麦茎基腐病(Fusarium crown rot of wheat)的优势病原菌,目前该病害呈不断蔓延和为害加重的趋势。本研究从五月中旬小麦灌浆期至玉米收获期,在河南开封和焦作田间调查采集小麦茎基腐病样,对13份小麦茎秆和小麦残茬上带子囊壳的病样在室内进行单子囊孢子分离培养,获得纯化菌株327个,用形态学和分子生物学方法鉴定均为假禾谷镰孢,交配型MAT1-1和MAT1-2各有164株和163株。对国外报道的有性态诱导方法进行了改进和优化,用不同交配型菌株在Sachs合成固体培养基配以水稻茎节对峙培养,在黑光灯和冷白光灯交替光照及22 ℃条件下,温箱培养60 d左右,KF86×KF73组合在水稻茎节处产生大量子囊壳和成熟子囊孢子。本研究利用假禾谷镰孢子囊孢子后代进行室内有性杂交实验,通过改进诱导子囊壳产生的培养条件,获得高育性菌株,为今后假禾谷镰孢基因功能的有性生殖阶段研究提供材料和方法。
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  水稻中MPK5稳态失衡抑制拟禾本科根结线虫与水稻的亲和互作

  牛永瑞, 许立鹤, 肖炎农, 肖立英, 肖雪琼, 王高峰

  植物病理学报. 2022, 52(1): 86-96. https://doi.org/10.13926/j.cnki.apps.000727

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  拟禾本科根结线虫(Meloidogyne graminicola)为水稻的重要土传病原,可严重为害水稻。本研究旨在探究水稻中丝裂原活化蛋白激酶5(MPK5)稳态失衡对拟禾本科根结线虫与水稻亲和互作的影响,并初步探讨其机制。首先,通过线虫侵染试验发现,在水稻中超表达和沉默MPK5 引发的MPK5 稳态失衡均可抑制拟禾本科根结线虫与水稻的亲和互作。qRT-PCR 分析结果显示,与水稻野生型不同,在MPK5 超表达和沉默水稻株系中MPK5 均受拟禾本科根结线虫诱导表达。同时,拟禾本科根结线虫可抑制MPK5 超表达株系中几丁质酶的表达,但诱导MPK5 沉默株系中病程相关基因PR5 与PR10 的表达。上述试验结果表明,MPK5 稳态失衡可导致MPK5 响应拟禾本科根结线虫的侵染,且在MPK5 超表达和沉默水稻株系中MPK5 介导水稻产生拟禾本科根结线虫抗性的机制不同。
实验方法
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  香梨果萼黑斑病菌Alternaria alternata遗传转化体系的建立及GFP标记菌株的获得

  宋博, 张丽娟, 朱晓锋, 徐兵强, 艾米都拉·克尤木, 阿布都克尤木·卡德尔, 杨森

  植物病理学报. 2022, 52(1): 97-103. https://doi.org/10.13926/j.cnki.apps.000491

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  为建立香梨果萼黑斑病菌链格孢(Alternaria alternata)的原生质体遗传转化体系,本实验以香梨果萼黑斑病菌强致病性菌株LI1为供试材料,研究菌龄、酶系统、酶解时间等对链格孢菌原生质体制备的影响。链格孢菌菌丝在CM液体培养基中培养20 h,以0.7 mol·L^-1 NaCl为稳渗剂,1%裂解酶+1%崩溃酶+1%蜗牛酶的酶液组合下,28 ℃酶解4 h,原生质体制备效率最高。通过PEG/CaCl₂介导法将含有潮霉素B抗性基因和绿色荧光蛋白基因的质粒转入链格孢菌LI1,转化子生长表型及外源基因的PCR鉴定结果表明抗性基因已成功整合到香梨果萼黑斑病菌中。成功建立了香梨果萼黑斑病菌链格孢菌的原生质体遗传转化体系,并成功获得GFP标记菌株,为病原菌侵染定殖过程及致病机制研究奠定了基础。
研究简报
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  草莓红叶根腐病病原菌分离与鉴定

  刘艳茹, 曹莹, 孙琰, 张志宏, 吴迪, 王丰, 严雪瑞

  植物病理学报. 2022, 52(1): 104-108. https://doi.org/10.13926/j.cnki.apps.000488

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  广西百香果采后果腐病病原的鉴定

  杜婵娟, 杨迪, 叶云峰, 张晋, 潘连富, 付岗

  植物病理学报. 2022, 52(1): 109-113. https://doi.org/10.13926/j.cnki.apps.000493

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  海南省番木瓜炭疽病的病原菌鉴定

  于婧, 李敏, 高兆银, 弓德强, 母军霞, 花静静, 李俊国, 胡美姣

  植物病理学报. 2022, 52(1): 114-117. https://doi.org/10.13926/j.cnki.apps.000738

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  辽宁丹东茭白瘟病的病原物鉴定

  刘锦涛, 谢帅, 王如锋, 芦文博, 闫晗, 杨俊

  植物病理学报. 2022, 52(1): 118-122. https://doi.org/10.13926/j.cnki.apps.000566

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  玉米NF-YC亚基基因的鉴定与表达规律分析

  王雪, 李瑾, 朱丽, 张悦, 藏金萍, 张康, 邢继红, 董金皋

  植物病理学报. 2022, 52(1): 123-128. https://doi.org/10.13926/j.cnki.apps.000736

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