红掌细菌性疫病(Xanthomonas axonopodis pv. dieffenbachiae,简称Xad)是红掌等天南星科花卉毁灭性病害,该病通过带菌种苗调运不断在我国扩散蔓延,国内尚未有检测方法。通过筛选和重新设计引物,建立了Xad 的PCR 检测方法,结果表明,利用引物Xad-F / Xad-R 进行PCR,能扩增出检测Xad 的特异性DNA 片断,其灵敏度可达1 × 102 CFU / mL,DNA 的最低检出限为0. 44 ng / μL,可用于红掌苗的带菌检测和红掌细菌病害的鉴定。

2009～2010年，从我国18个省（市）采集了176份表现病毒病症状的甘薯样品。利用血清学、PCR和核苷酸序列测定的方法，对上述样品中的病毒种类进行了鉴定。血清学检测结果表明，供试样品中甘薯羽状斑驳病毒（SPFMV）的阳性率最高，达56.3%，其次为甘薯G病毒（SPVG）和甘薯类花椰菜花叶病毒(SPCaLV)，阳性率分别为34.1%和33.5%。PCR和核苷酸序列测定结果表明，我国甘薯上至少存在SPFMV、SPVG、甘薯潜隐病毒（SPLV）、甘薯褪绿斑病毒（SPCFV）、甘薯褪绿矮化病毒（SPCSV）、黄瓜花叶病毒（CMV）、甘薯脉花叶病毒（SPVMV）和甘薯卷叶病毒（SPLCV）8种病毒。此外，供试样品中没有检测出甘薯轻斑驳病毒（SPMMV），是否存在甘薯轻斑点病毒(SPMSV)、SPCaLV和C6病毒尚不能确定。

香石竹斑驳病毒(Carnation mottle virus, CarMV)是侵染香石竹的主要病毒之一。本试验从12 个香石竹品种中获得CarMV 分离物,通过RT-PCR 扩增包含p7、p9、CP 3 个主要基因的片段,并对扩增产物进行克隆测序。通过序列比对发现CarMV 的p7、p9、CP 3 个基因有较高的稳定性,p7 基因核苷酸序列相似性为98. 10% ,氨基酸序列相似性为97. 81% ,其中氨基酸的第11 和14 位存在显著差异;p9 基因核苷酸序列的相似性为98. 80% ,氨基酸序列相似性为99. 13% ,氨基酸序列在第4 差异明显;CP 基因核酸序列相似性为97. 58% ,氨基酸的相似性为98. 43% ,氨基酸序列的第164 和331 位的变异存在相关性,整个CP 变异位点比较分散。证实p7 和p9 的变异位点主要集中在暴露与寄主互作相关的N 端,推测这是导致病毒变异,与寄主互作变异的重要位点。

镰刀菌产生的脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)污染小麦后对人畜具有较大的毒害作用。为明确DON毒素在小麦籽粒中的积累数量及其与镰刀菌菌株、接菌数量、小麦品种和病害严重度的关系,试验采用单花滴注方法在5个抗病性不同的小麦品种上分别接种9 个禾谷镰刀菌菌株,每个菌株接种1 × 106 、1 × 105 和1 × 104 个/ mL 3 个分生孢子浓度,并利用ELISA 法测定收获麦粒中DON 毒素含量。结果表明,麦粒中DON 毒素含量差异主要是由于不同禾谷镰刀菌菌株产生毒素能力不同所致。接种菌株8003、4020 的所有麦粒中DON 毒素含量均显著高于相同条件下接种其他7 个菌株的小麦。当接种产毒素能力强的菌株时,小麦抗病品种表现出在一定程度上降低DON 毒素积累的能力。不同接菌浓度对小麦赤霉病的发病程度和麦粒中DON 毒素含量有显著影响,在相同条件下,接菌浓度越高,病害严重度越高,DON 毒素含量也越高;反之,接菌浓度越低,病害严重度越低,DON 毒素含量也越低。

采自河北承德11 个表现矮花叶症状的玉米样品,用甘蔗花叶病毒(Sugarcane mosaic virus, SCMV)和白草花叶病毒
(Pennisetum mosaic virus, PenMV)简并引物扩增了基因组3′ 端约2. 1 kb 的片段并进行测序。Blast 结果表明其中8 个样
品含有PenMV。扩增到的PenMV 序列均为2 135 nt,包括部分NIb 基因(985 nt)、完整的CP 基因(909 nt)和3′-UTR(241
nt)。这8 个分离物CP 基因和3′-UTR 与GenBank 上其他PenMV 分离物相应序列的核苷酸一致率分别为89. 8% ~ 93． 4%
和95. 9% ~ 97. 9% 。根据扩增的2 135 nt 序列和CP 基因序列构建系统发育树,8 个分离物与GenBank 上其他PenMV 分离
物都分为2 个组:山西组和承德组。重组分析表明CD9 的CP 基因存在重组。

分别以花生条纹病毒红安株系(PStV-Hongan)外壳蛋白基因(CP),花生矮化病毒轻型株系(PSV-Mi)和花生黄瓜花叶病毒(CMV-CA)复制酶基因2a为模板,通过PCR 方法分别得到PStV-CP 5′ 端,PSV-Mi 和CMV-CA 2a3′ 端150 bp 的片段,3 种片段混合物为模板经PCR 拼接得到450 bp 的片段,此拼接片段通过Gateway 系统重组至植物表达载体pK7GW1WG2,得到含反向重复拼接片段的植物表达载体pK450。冻融法导入根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)菌株GV3101 后,叶盘法转化本生烟(Nicotiana benthamiana),经PCR 检测,获得转基因植株。对T1 代转基因植株分别人工接种3 种病毒,66. 7% 的植株表现对PStV 免疫,9% 的植株表现对CMV-CA 的恢复抗性,全部植株对PSV 感病。siRNA 的Northern blot 结果表明,所有转基因烟草植株都含有病毒特异siRNA,siRNA 含量随接种后时间延长而衰减。

测定了采自安徽省岳西、潜山、和县、合肥、寿县、淮南、阜南、亳州等不同地区的64 株辣椒疫霉菌株的交配型,并用10 μg / mL 的甲霜灵处理A1 交配型的菌株HN8 和A2 交配型的菌株HN3,分别获得抗性突变菌株HN8-Mrt和HN3-Mrt,进一步测定交配型在HN8、HN3 及其抗性突变株游动孢子后代中的遗传稳定性。结果发现,供试菌株中A2 交配型58 株(占90． 6% );A1 交配型6 株(占9. 4% ),未发现A0 、A1 A2 和A1 ,A2 交配型;A2 交配型全省各地均有分布,A1 交配型只出现在和县、淮南和阜南3 地;HN8-Mrt与HN8、HN3-Mrt与HN3 的交配型分别相同,各菌株单游动孢子后代的交配型均与其亲本分别相同。结果说明,辣椒疫霉交配型在安徽的分布呈不均等的态势,其中以A2 型占绝对优势;用甲霜灵处理不会诱导辣椒疫霉交配型的变异,交配型在辣椒疫霉的游动孢子后代中能稳定遗传。

 啤酒花矮化类病毒重组突变体（HSVd D15）是世界上报道过的仅有的一个啤酒花矮化类病毒（HSVd）分子内重组突变体。为研究其生物学活性，本文分别构建了含有HSVd和HSVd D15 cDNA加倍串联序列的重组质粒，并对其在指示植株四叶黄瓜上的侵染活性进行了检测。结果表明：仅在接种含有HSVd cDNA多倍串联序列重组质粒的黄瓜上检测到HSVd的侵染，在同样条件下接种了含有HSVd D15 cDNA两倍串联序列重组质粒的黄瓜上未检测到子代类病毒。HSVd D15的生物学活性还需通过改进接种方法或将其接种无毒的自然寄主李树苗木来进一步研究。

小麦-簇毛麦6VS. 6AL 易位染色体含有抗白粉病基因Pm21,在我国的小麦育种中被广泛应用。近年来,一些含有Pm21 基因的小麦品种(系)开始感染白粉病。为探索含Pm21 的品种(系)感染白粉病的原因,本研究在6VS. 6AL 易位系与小麦品系(种)R14 和川农12 的杂交后代中利用分子标记CINAU17-1086 和CINAU18-723 辅助选择的遗传背景相对简单的F7 和F8 近等基因系为材料,研究了小麦抗白粉病基因Pm21 的抗病性表达。结果发现,在3 个含有6VS. 6AL 易位染色体的感病F6 植株繁殖的F7 近等基因系中发生了白粉病抗性的分离,分离比率符合13 感病︰ 3 抗病的理论值。在随机选取的F7 感病小麦单株所繁殖的F8 近等基因系中,有7 / 13 的株系一致地重感白粉病,有6 / 13 的株系发生了抗白粉病的分离,其中2 / 13 的株系分离比符合3 感病︰ 1 抗病、4 / 13 的株系分离比符合13 感病︰ 3 抗病的分离模式。这一结果指出,小麦株系中的抗白粉病基因Pm21 的抗性表达受小麦基因组中的一对显性抑制基因所控制,该基因来源于小麦品种(系)川农12或R14,建议命名为SuPm21。本研究指出,在把外源基因引入小麦的研究中,有利的外源基因与不含抑制基因的受体遗传资源同等重要。

本文利用BOI(Botrytis Susceptible 1 Interactor)基因敲减(knock-down) 株系、过量表达株系以及烟草瞬时表达系统,研究了BOI 基因在细胞程序化死亡(PCD)中的作用以及BOI 蛋白中RING 和WRD 结构域的功能。结果表明,BOI 基因的表达下调导致抗氧化胁迫能力下降,弱化了对活性氧介导的PCD 抑制作用;BOI 过量表达或瞬间表达可以增强对活性氧介导和α-吡啶甲酸诱导的PCD 的抑制作用。进一步研究发现,BOI 蛋白中的RING 结构域是BOI 抑制PCD 所必需的,WRD 结构域与BOI 对PCD 的抑制作用关系不大。

以大丽轮枝菌(Verticillium dahliae Kleb. )菌体为唯一碳源,采用液体培养法测定供试病原菌菌体对4 株拮抗链霉菌胞壁水解酶合成的诱导作用;采用平皿气生菌丝水解和显微观察法验证4 株拮抗链霉菌对大丽轮枝菌菌丝的溶解作用。结果表明:①大丽轮枝菌菌体可以诱导供试链霉菌合成几丁质酶、β-1,3-葡聚糖酶、β-葡萄糖苷酶及滤纸纤维素酶;当菌体添加量为10 g·L - 1 ,28℃ 培养7 d 时,上述4 种诱导酶活性可达峰值,其值分别为70. 13 - 129. 05、31. 04 - 37. 34、6. 24 -8． 75 及1. 84 - 3. 35 U。②链霉菌粗酶液对大丽轮枝菌菌丝有溶解作用。③4 株链霉菌菌丝均可缠绕在大丽轮枝菌菌丝上,并在缠绕处使病原菌菌丝溶解。

An one-step dual RT-PCR method was developed for Southern rice black-streaked dwarf virus (SRBSDV) detection from host plants and insect vector white-backed planthopper (Sogatella furcifera Horvath,Hemiptera: Delphacidae), from which two cDNA fragments of the viral genome S5 and S10 were amplified
simultaneously. Two primer pairs, S5-F1 / S5-R2 (5′-ttacaactggagaagcattaacacg-3′ / 5′-atgaggtattgcgtaactgagcc -3′) and S10-oF / S10-oR(5cgcgtcatctcaaactacag -3′ / 5′-tttgtcagcatctaaagcgc -3′), were selectedfrom 40 primer pairs based on SRBSDV genome sequences, and amplified viral S5 ORF1 fragment (819 bp) and cp gene fragment ( 682 bp), respectively. Using total RNA extracts from infected plant leaf tissue or individual planthopper adult as templates, one step RT-PCR reaction in the conditions of annealing temperature of 53℃ with the final concentrations of 240 nmol / L S5-F1 / S5-R2 and 120 nmol / L S10-oF / S10-oR generated a similar yield of two amplicons in argrose electrophoresis analysis. Sequence analysis confirmed the correct
result of the amplification. Additionally, several commercal RNA extraction kits was proven to be fit for the template preparation, and the protocol for total RNA extraction from plant leaf tissue and individual planthopper was simplified by sample grinding direct in eppendorf tube. This method can be used for SRBSDV detection of dried or 70% alcochol soaked planthopper samples stored over one month in room temprature. Key words: Southern rice black-streaked dwarf virus; Sogatella furcifera Horvath

Potato virus Y (PVY) is the type member of the genus Potyvirus and infects several important solanaceous crops, including tobacco. PVY is one of the most widespread and economically destructive viruses.The P1 region of PVY had been used to determine the diversity, evolution and the homology based on the
geographic location of the virus. The P1 region of PVY tobacco isolate from Qianxi in Guizhou Province was cloned and sequenced. Database searches and multiple sequence alignment showed subtle variation within the same strain, while apparent variation between O strain and the other three strains, N, NTN and N∶O. Moreover, variation in P1 region of Qianxi isolate derived from the gene mutation rather than the recombination among genomes. Phylogenic analysis revealed that the clustering only discriminated O strain from others. Consequently, sequence analysis in P1 region is unable to afford strain determination.

BD SMART technique and LD-PCR were applied to synthesize double strand cDNA(ds cDNA).The ds cDNA and pGADT7-Rec were transfered into competent yeast cell to construct yeast two-hybrid cDNA library of Curvularia lunata by homologous recombination method. The results showed that library capacitance was 2. 46 × 105 and transformation rate was 2. 13 × 105 / μg pGADT7-Rec. The plaque titer of the library was 2. 5 × 108 pfu / mL and the recombination frequency was 88. 24% . The length of inserted cDNA fragment was ranged from 0. 4 kb to 3 kb in average. This is the first time to use BD SMART technique to construct yeast two-hybrid cDNA library of C. lunata by homologous recombination.

The mycelium growth rate method was used to test the sensitivity to carbendazim (MBC) at distinctive concentrations in 136 isolates of Fusarium graminearum from 19 counties of 6 districts in Shaanxi Province in 2008. The distinctive MBC concentration was 4 mg / L for testing of resistance and sensitivity. The results showed that average 50% effective concentration (EC50 ) of 136 tested sensitive isolates were (0. 908 6 ± 0. 062 3) mg / L. All the isolates were sensitive to MBC. The fungicide of MBC could be continually applied wheat production in Shaanxi.

The efficient and accurate method of inoculating Exserohilum turcicum on maize is most important for studying the corn leaf blight. In this study, four approaches including spore suspension spraying, inoculation with grinding infected maize leaves, inoculation liquid inoculum into the leaf whorl and inoculation with inoculated sorghum seeds were compared with natural induction in fields during different growth stages of maize in the greenhouse and field. The results showed that disease incidence of all varieties tested were up to 100% by inoculating with inoculated sorghum seeds during the booting stage (11 to 12 leaf stages). This method will not only guarantee the enough pathogen inocula but also be easy to use, and could be an effective way for disease resistance identification in field and greenhouse. 

An antagonistic Streptomyces strain B28, isolated from the soil collected in Tianmu mountain of Zhejiang Province, was identified as Streptomyces diastatochromogenes by morphological , physiological & biochemical characteristics and 16S rDNA sequence alignment. Antagonistic study indicated that its secondary metabolite toyocamycin had an antifungal activity on the mycelial growth of seven species of plant pathogenic fungi. The results showed that toyocamycin possessed marked inhibitory activity against Rhizoctonia solani and the EC50 value was 0. 58 μg / mL. The effective of toyocamycin against Botrytis cinerea and Fusarium oxysporum f. sp. cucumerinum was much higher than that against Colletotrichum gloeosporioides, the EC50 value of
toyocamycin in inhibiting B. cinerea, F. oxysporum and C. gloeosporioides were 13. 65 μg / mL, 12. 33 μg / mL, and 30. 15 μg / mL respectively.

本研究对茄子棒孢叶斑病的症状进行系统的描述，采用致病性试验、形态学观察及分子生物学的方法对茄子棒孢叶斑病的病原菌进行鉴定。致病性试验证实病原菌对茄子的致病力显著高于黄瓜。显微观察发现同一病原菌在茄子上形成的孢子以圆柱形为主，孢子体较窄；而在黄瓜上形成的孢子具有圆柱形和倒棍棒形两种形态，且较宽。对病原菌rDNAITS区进行PCR扩增和序列测定。综合形态特征、致病力和分子序列分析结果，确定茄子棒孢叶斑病病原菌为Corynespora cassiicola。

2009 年8 月湖南省芷江县线果型辣椒品种红秀2003 未成熟果实上发生了一种新炭疽病。典型病斑长椭圆状,其中央呈成片黄褐色粉末,外围粉红色小点呈同心圆排列,边缘水渍状。8个分离菌株（HNZJ001HNZJ008）培养时菌落初呈白色,渐变为浅红色,后期加深, 具明显灰黑色同心轮纹。分生孢子盘无刚毛, 分生孢子单胞，大小为15. 8 μm × 4. 1 μm,含2～7 个油球,一端稍尖。分离菌株HNZJ001 针刺接种,在离体的成熟果和未成熟果上均产生病斑,而作为对照的胶孢炭疽菌Collectotrichum gloeosporioides菌株LSQ1 不能侵染未成熟果。核糖体RNA 基因内转录间隔区(ITS)的PCR 产物经〖JP2〗测序后做BLAST 分析,结果表明该菌与尖孢炭疽菌C. acutatum(有性阶段为尖孢小丛壳Glomerella acutata)的ITS 序列100% 相同,系统进化分析显示置信度高达100%,据此确定该病原为尖孢炭疽菌。这是国内辣椒上尖孢炭疽菌的首次报道。

以带有鸢尾黄斑病毒的烟草叶片为材料，研究建立了IYSV的普通RTPCR、免疫捕获RTPCR和SYBR Green Ⅰ实时荧光RTPCR方法，并比较了几种检测方法的灵敏度。结果表明，DASELISA检测灵敏度较低，为1 mg带毒叶片。而各种PCR方法的灵敏度均高于DASELISA 100倍以上，其中SYBR Green Ⅰ实时荧光RTPCR检测灵敏度最高，可从0.4 μg的带毒叶片中检出IYSV，而RTPCR的灵敏度为40 μg带毒叶片，ICRTPCR的检测灵敏度是RTPCR的4倍。鉴于DASELISA灵敏度较低，建议在用ELISA初筛时，如样品OD405值与阴性对照OD405值之比在2.0左右时需要再用分子方法加以确证，以防漏检。

通过透射电子显微镜，在表现卷叶、褪绿症状的丁香(Syringa oblata)样品的叶脉韧皮部筛管细胞内观察到大量植原体粒子。应用植原体16S rRNA基因通用引物对P1/P7和R16F2n/R16R2对表症丁香植株总DNA进行巢式PCR扩增，得到了约1.2 kb的目标片段，通过对扩增片段进行测序、系统发育分析和同源性分析，结果表明，该片段长度为1 246 bp，在系统发育进化树上与翠菊黄化组（Candidatus Phytoplasma asteris）成员是聚集在一起的，与该组成员同源性均在98%以上。用16Sr RNAⅠ组和Ⅴ组特异引物确定了该病害非混合侵染所致，相似性系数和RFLP分析表明该植原体属于16SrⅠB亚组。这是国内关于翠菊黄化组植原体在丁香上感染的首次报道。

利用RTPCR方法从绿木霉ZBS6中扩增了几丁质酶基因Tvchi，序列分析表明Tvchi 开放阅读框为1 293 bp，编码430个氨基酸残基，Blast 分析表明，与多种木霉18家族内切几丁质酶具有较高的同源性。将该基因克隆到原核表达载体pET28a上，转化大肠杆菌BL21(DE3)，经IPTG诱导，SDSPAGE和Western印迹分析表明成功的获得了47 kD 的融合蛋白。该融合蛋白经NiNTA柱亲和纯化，获得了纯度较高的融合蛋白Tvchi。Tvchi最适酶活温度为37℃，最适酶活pH值为6.8。表达产物对小麦全蚀病、赤霉病、纹枯病病原菌显示出较好的抑菌活性。本研究结果将为进一步研究木霉几丁质酶的应用提供了基础。

为研究黄蓝状菌（Talaromyces flavus）几丁质酶性质和作用，通过RTPCR、3′ RACE及5′ TAILPCR技术克隆了一个黄蓝状菌几丁质酶基因tfchi1，该基因全长为2 561 bp，含有6个内含子，包含一个1 194 bp的ORF，编码397个氨基酸，分子量为43.47 kDa，属于糖苷水解酶第18家族。利用基因重组的方法构建酵母分泌型表达载体pPIC9K/tfchi1，并转化毕赤酵母，筛选得到一株高效表达几丁质酶的工程菌GSTFCHI19，甲醇诱导第7 d酶活性最高，达32.29 U·mL-1。SDSPAGE检测纯化重组蛋白的分子量约44 kDa。重组几丁质酶Tfchi1最适反应温度为35℃，最适反应pH值为5.5，在pH 6～8之间稳定。Zn2+、Cu2+对 Tfchi1活性有明显的抑制作用。抑菌活性测定结果显示，Tfchi1可明显抑制敏感植物病原真菌的菌丝生长和分生孢子萌发。该酶在几丁质资源的开发利用和生物防治等领域具有较广的应用前景。

以抗稻瘟病水稻近等基因系C101LAC及CO39为材料，应用差异蛋白组学技术对外源茉莉酸甲酯（MeJA）诱导8 h和12 h后的水稻叶片蛋白质差异表达变化进行了分析。采用PEG4000预沉淀法提取水稻叶片总蛋白，经双向电泳、凝胶染色和图像分析，结果表明：与对照相比MeJA处理后的2个水稻品系中共有21个蛋白质表现为2倍以上的表达差异。其中，MeJA处理8 h后，CO39中的差异表达蛋白质点有5个，C101LAC中有8个，U5为2个品系中均新增的蛋白质点。MeJA处理12 h后，CO39中有6个差异表达蛋白质点，C101LAC中则有5个。经胶内酶解、MALDITOF/TOF质谱分析及数据库检索，成功对21个差异表达蛋白质进行了鉴定，其中新增的蛋白质点U5被鉴定为内切β1,31,4葡聚糖酶。依据GO数据库和UniProtKB数据库提供的蛋白质注释信息，按照功能可将21个差异表达蛋白质分为8类，分别在植物抗性、氨基酸代谢、信号转导、光合作用、光呼吸、糖代谢、蛋白质合成与分解及细胞代谢等方面发挥作用。

为查明青海地区晚疫病菌单倍型分布情况，本研究对青海不同地区采自2006～2007年的70个晚疫病菌材料的线粒体单倍型进行了分析，结果表明：94.3%的菌株为Ⅱa型，5.7%的菌株为Ⅱb型，其中Ⅱb型均分离自番茄。这说明青海地区马铃薯晚疫病菌群体类型比较单一，主要为Ⅱa型，线粒体单倍型不存在多态性。

为了阐明OsBTF3基因在水稻对白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv. oryzae, Xoo)和细菌性条斑病菌(X. oryzae pv. oryzicola, Xoc)侵染抗/感反应中的功能，本研究以OsBTF3过量表达和RNAi转基因株系为材料，比较分析了T1代株系对病菌侵染的抗感病反应，定量测定了防卫基因的表达动态。结果表明，与野生型对照株相比，无论过量表达株系,还是RNAi株系对Xoo和Xoc侵染均表现为更加感病的反应; 经Xoo接种后，过量表达和RNAi株系OE37和RNAi株系RI30防卫基因的表达发生了不同程度的变化。因此，OsBTF3增量/减量表达对水稻抗/感病性具有重要的调控作用，这种作用可能并不依赖于水杨酸(SA)和茉莉酸(JA)介导的信号途径。

水稻白叶枯病菌（Xanthomonas oryzae pv. oryzae, Xoo）和条斑病菌（Xanthomonas oryzae pv. oryzicola, Xoc）是水稻上的模式病原菌，分别引起水稻白叶枯病（bacterial blight, BB）和细菌性条斑病（bacterial leaf streak, BLS）。为了精确和高效地实现目的基因的突变，本研究利用pK18mobGⅡ载体，建立了一套适于Xoo和Xoc目的基因定点插入的突变体系。通过同源片段与目的基因间的同源重组，成功获得了Xoo和Xoc的hrcV和hrpF突变体。PCR和Southern杂交证实：pK18mobGⅡ携带不同大小的同源片段，能够整合于hrcV和hrpF的特定位点；200～400 bp的同源片段能够获得最佳的突变效率；两亲接合的转化效率是电转化的5～100倍。毒性测定结果显示，hrcV基因决定着Xoo在水稻上的致病性。致病相关基因插入突变体系的建立为研究水稻黄单胞菌与水稻互作中致病相关基因的功能奠定了遗传学研究基础。

利用离体叶片接种法，将12个对温度不同敏感性的小麦白粉病菌株分别在18℃和22℃条件下的流行组分（潜育期、侵染几率、单病斑累积产孢量和病斑日扩展面积）和寄生适合度进行了测定。结果表明，对温度不同敏感性菌株的流行组分在18℃和22℃条件下均存在显著性差异，且单病斑累积产孢量与病斑日扩展面积的相关性最高。各供试菌株在22℃条件下的寄生适合度均低于18℃条件下的寄生适合度。在两温度条件下，对温度低敏感性菌株平均寄生适合度高于对温度高敏感性菌株，特别是在较高温度下这种趋势更为明显。

应用电镜观察和ELISA检测从云南11个县（市）烟草种植区采集的烟草上检测到番茄环纹斑点病毒（Tomato zonate spot virus, TZSV）。根据TZSV N基因设计引物扩增得到了31个TZSV分离物N基因全序列。测序分析表明，31个TZSV N基因核苷酸序列与GenBank中报道的序列相似性在94.9%~98%之间，其推导的氨基酸序列同源性为98.2%~99.3%。构建系统进化树发现云南不同地区的TZSV分离物存在一定差异。氨基酸序列比较发现，文山分离物和西畴分离物具有2个该地区独有的氨基酸位点。

To explore the potential application of unmanned aerial vehicle (UAV) on monitoring wheat stripe rust caused by Puccinia striiformis f. sp. tritici, the image of wheat plots was obtained at the UVA platform. Correlation analyses between disease indexes of stripe rust and four kinds of the reflectance, i.e. the canopy reflectance and the reflectances in red, green and blue band extracted from the image, were conducted. The estimation models between disease indexes and each kind of the reflectance were built using linear regression method. The results showed that there was an extremely significant difference between the reflectances of diseased wheat plots and healthy plots. Disease indexes had positive correlation with the four kinds of the reflectances. Disease index was best fitted by the model with the reflectance in red band as independent variable. The diseased and the healthy areas in the UAV image were distinguished by using ISODATA method. The results indicated that UVAbased monitoring of wheat stripe rust was feasible and image analysis technologies could play a potential role in the monitoring process.

The fungicide resistance of anthracnose in Camellia oleifera nurseries was investigated in Liuyang, Changning, and other regions in Hunan Province. The Colletotrichum gloeosporioides strains from the former two regions were highly resistant to carbendazim. After subcultured for 10 generations on fungicidefree medium, the resistant strains grew well on the medium containing carbendazim 450 μg/mL and suggesting that its resistance was stable. The βtubulin genes from the resistant and susceptible strains were cloned and sequenced.  The coding region was 1 344 bp nucleotides and predicted to encode a protein with 447 amino acids. Comparison of the βtubulin amino acid sequences between resistant and susceptible strains of Colletotrichum gloeosporioides revealed that a mutation leading to an amino acid substitution at the position 198 from glutamic acid in the susceptible strain to alanine in the resistant strain. Finally, the main morphological characteristics of C.gloeosporioides were descripted，but it could not be used to determine the resistance to carbendazim.

在真核生物中，DNA甲基化可导致基因特异表达、细胞分化和染色体失活等［1，2］，可在不改变DNA碱基排列顺序的同时，阻断遗传信息的传递，从而引起形态等性状的变化［2］。泡桐(Paulownia spp.)是我国重要的速生用材和绿化树种之一，对改善我国生态环境和提高农民收入具有重要的意义，但丛枝病发生给我国泡桐生产造成了巨大的经济损失，也严重影响了人们种植泡桐的积极性。自从发现泡桐丛枝病病原为植原体以来，人们对其病原和丛枝病发生的生理生化变化进行了大量的研究［3，4］,但对寄主染病泡桐本身分子生物学研究较少。近年来，虽然科技工作者对丛枝病泡桐蛋白质组和DNA甲基化水平开展了一些研究工作［4］，但至今国内外未见有关DNA甲基剂对泡桐丛枝病发生影响的文献报道。因此，本文以毛泡桐丛枝病组培苗为材料，利用巢式PCR和SSR技术，研究了DNA甲基剂甲基磺酸甲酯（MMS）对毛泡桐丛枝病发生和DNA碱基序列的影响。

Four cereal cyst nematode (CCN) populations of wheat were collected from Boai, Qingfeng, Anyang counties in Henan Province and Handan county in Hebei Province in 2009. The cyst of Boai population had distinct underbridge in the vulval cone area, but other three tested populations had not. The main morphological characteristics and measurements of the cyst and the second juvenile of Boai population conformed to Heterodera filipjevi, and that of the populations from Qingfeng, Anyang and Handan conformed to H. avenae. The result of ITS sequence analysis and alignment indicated that Boai population and related species H. filipjevi from America and Italy were clustered in the same group with close relationship by MP of MEGA 4，and the three populations from Qingfeng, Anyang, Handan and the related species H. avenae from Tongzhou and Zhengzhou were clustered in the same group. Based on the morphological and molecular characteristics, the Boai population was identified as H. filipjevi and the other three populations were identified as H. avenae.

来自我国12个省84个县（市）的棉花黄萎病菌，在PDA培养基上存在5种不同的培养类型,其中，产生微菌核较多的B型菌株为优势类群，占72.9%。长江流域的菌株培养性状变异最大，新疆棉区的变异最小。致病力测定结果和ISSR指纹图谱均将167个单孢菌株划分为强、弱、中3个致病力类型，供试菌株的ISSR指纹图谱与菌株的致病力存在明显的相关性。中等致病力类型菌株在我国占主导地位；强致病力类型的菌株主要分布在河北、河南、湖北等省；弱致病力类型菌株主要分布在新疆和江苏。

在湖南省常德市西洞庭管区种植的朝鲜蓟（Cynara scolumus  L.）上发现了一种新的病害，其症状表现为地上部分从外层叶片开始逐步枯萎，随后根部和主茎杆的髓部腐烂变褐，最后整株枯萎。从田间感病朝鲜蓟茎杆的病健交界处用NA培养基分离，获得10个菌株，分别指定为HNXDT001~010，并进行了致病性测定、形态观察和细菌学特征分析，同时对HNXDT002菌株进行分子生物学鉴定。结果表明，该系列菌株在NA培养基上均形成灰白色圆形菌落，稍突起，有光泽，半透明。在显微镜下菌体呈短杆状，两端钝圆，具有2～8根周生鞭毛，革兰氏阴性。10个菌株通过针刺法接种均可导致朝鲜蓟茎杆、胡萝卜、辣椒、白菜、土豆、番茄和莴苣茎杆软腐，经科赫法则验证为致病病原菌。该菌株的16S rDNA序列和果胶酶基因片段测序(分别用16S rDNA通用引物16SF/16SR和果胶酶基因引物Y1/Y2扩增)与系统发育学分析表明，其16S rDNA序列(GenBank Accession No. JF721958)与胡萝卜软腐果胶杆菌胡萝卜亚种（Pectobacterium carotovorum  subsp.  carotovorum）菌株ATCC15713 (GenBank Accession No. U80197)序列同源性高达99％;果胶酶基因序列(GenBank Accession No. JF721960)与胡萝卜软腐果胶杆菌胡萝卜亚种（Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum）PC1菌株(GenBank Accession No. CP001657)序列同源性为93%。结果表明：朝鲜蓟细菌性根茎腐烂病病原为胡萝卜软腐果胶杆菌胡萝卜亚种。

从四川碧峰峡撑×绿杂交竹健康植株根际分离到对杂交竹梢枯病菌(Arthrinium phaeospermum)有强拮抗作用的放线菌菌株YSSPG3，该菌株的无菌发酵液对多种真菌和细菌具有抗菌活性。通过对菌株YSSPG3的形态特征、培养特性、生理生化特性、细胞壁组分与16S rDNA 序列分析，确定为绛红褐链霉菌(Streptomyces purpeofuscus)。采用硫酸铵沉淀和柱层析法对发酵液中起主要抑菌作用的抗菌物质进行分离纯化，获得单一的抗菌蛋白AMP，分子量为5 075.619 Da，等电点为6.77。抗菌蛋白在温度≥60℃和pH＜7，以及紫外线照射时间≥12 h的环境下抑菌活性均明显下降，但受蛋白酶K、胰蛋白酶和氯仿影响不大，无几丁质酶、葡聚糖酶等水解酶活性。利用Edman降解法测定抗菌蛋白N末端25个氨基酸序列，与来自 Streptomyces tendae  Tü901 的chitin-binding protein AFP1的同源性较高，为81.00%。

为了制备小麦赤霉病菌的α-微管蛋白，以小麦赤霉病菌cDNA为模板，PCR扩增出α₁-、α₂-微管蛋白基因，将其克隆到pET30a⁺表达载体上，转化到表达宿主菌Rossatta（DE3）pLysS，筛选阳性克隆，进行蛋白诱导表达。SDS PAGE及Wes-tern-b1ot结果表明：融合蛋白主要以包涵体形式存在；融合蛋白分子量约为52.1和55.9 kD；融合蛋白能与抗6×His的单抗发生特异性反应。通过对包涵体洗涤及透析复性后采用HisTrap^TM  HP Columns对融合蛋白进行纯化，可以得到纯度较高的融合蛋白。该研究为体外筛选以微管蛋白为靶标的杀菌剂提供了物质基础。

本研究利用来自我国南北稻区田间稻瘟菌菌株，对其进行了低温耐受性比较和统计分析。结果表明，南方与东北田间稻瘟菌在低温耐受性上存在明显差异：95%东北菌株可以忍受至少一周的-15℃低温处理，而相同条件下南方菌株仅有65%菌株存活。模拟东北冬季田间生境，选取10株低温敏感型菌株进行临界致死低温条件下的继代处理，发现-15℃条件下反复冻融处理55次后，其中8株低温耐受水平得到显著提高，且部分菌株的培养性状和抗药性相继发生改变。在此基础上，对抗性增强菌株的非原生质体蛋白进行双向电泳和差异蛋白质质谱分析，获得了响应低温的分泌蛋白及其指纹信息。本研究为进一步探索温度等环境因子对稻瘟菌的致变作用奠定了基础。

马铃薯Y病毒属病毒编码的辅助成分-蛋白酶（helper component-proteinase，HC-Pro）是第一个被鉴定的RNA沉默抑制因子。本研究通过定点突变的方法获得了马铃薯A病毒（Potato virus A，PVA）HC-Pro的3个突变体, 利用农杆菌共浸润的方法分析了这些突变对HC-Pro抑制RNA沉默活性的影响。与野生型HC-Pro处理相比，Phe⁶、Asn¹¹ 缺失突变体的处理中绿色荧光减弱，而Ile²⁵⁰-Gly²⁵¹-Asn²⁵²（IGN）基序中的Ile和Gly分别突变为Asp和Glu的处理中观察不到绿色荧光。该结果表明Phe⁶、Asn¹¹ 和IGN²⁵⁰  3个位点均参与调控HC-Pro的抑制RNA沉默活性。

冬小麦品种陇鉴9821是以甘肃陇南感病生产品种洮157为受体，以高粱总体DNA为供体系统选育而成，具有较好的丰产性和抗条锈性。本文对陇鉴9821抗条锈性及其遗传特点进行了研究，结果表明：苗期抗条锈基因推导分析得出，陇鉴9821对供试菌系的抗性谱与已知基因不同，含有未知抗条锈病基因；遗传分析显示对CYR29和CYR33的抗病性均由1对显性基因控制；通过抗病性鉴定和抗谱比较分析，认为陇鉴9821对CYR29和CYR33表现显性抗病性的基因是2对不同的抗条锈病基因，其中1对来自洮157。陇鉴9821可作为生产品种及抗源材料在生产上利用。