2009年, 第39卷, 第3期　刊出日期：2009-06-10

  

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病原学
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  山西壶瓶枣缩果病病原菌分离和鉴定

  徐祥彬, 赖童飞, 景云飞, 徐勇, 田世平

  植物病理学报. 2009, 39(3): 225-230.

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  2005~2008年山西壶瓶枣缩果病害发生严重,造成了巨大的经济损失。本文利用真菌ITSrDNA和细菌16S rDNA基因的通用引物,分别对分离自山西晋中的罹病壶瓶枣果实表面寄生真菌和细菌基因组DNA进行PCR扩增,将扩增产物进行核苷酸序列测定,在GenBank数据库进行Megablast同源性分析,确定壶瓶枣果实的主要寄生菌是细极链格孢菌(Alternaria alternata)、白囊耙齿菌(Irpex lacteus)、青霉菌(Penicillium expansum)、芽枝孢菌(Cladosporium tenuissimum)4种真菌和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、巨大芽孢杆菌(B.megaterium)、短小芽孢杆菌(B.pumilus)、多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)4种细菌。回接试验证明链格孢菌、青霉菌、芽枝孢菌是壶瓶枣果实主要的致病真菌,而所分离的细菌没有致病性。
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  广东水稻白叶枯病菌遗传多样性和小种分化研究

  曾列先, 陈深, 张慧, 潘汝谦, 杨健源, 伍圣远, 翟培茹, 朱小源

  植物病理学报. 2009, 39(3): 231-237.

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  通过IS-PCR和rep-PCR指纹技术,分析了广东水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae)群体遗传多样性。用2对特异性引物J3和ERIC对114个菌株基因组DNA进行了PCR扩增,分别呈现89和40种谱型,以彼此间的带位相似率达70%为界,J3扩增的谱型被分为11簇,ERIC的谱型被分为8簇。J3的簇1包含89个菌株,占总数的78.07%,ERIC的簇1包含52个菌株,占总数的45.61%,均为优势簇群。群体遗传多样性值J3为0.8919,ERIC为0.8278。上述结果表明,广东水稻白叶枯病菌的遗传多样性较高。全部参试菌株接种于含有不同抗性基因近等基因系及高感品种金刚30共6个鉴别品种,被划分为6个小种(X-gd1,X-gd2,X-gd3,X-gd4,X-gd5和X-gd6),X-gd4出现频率最高,为广东省的优势小种。
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  进境澳大利亚豌豆细菌性萎蔫病病原菌的分离鉴定

  崔汝强, 胡学难, 廖金铃, 钟国强, 郭权, 王卫芳, 冯黎霞, 赵立荣, 吴海荣, 胡佳

  植物病理学报. 2009, 39(3): 238-242.

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  2008年3月自澳大利亚进口的豌豆种苗病变部位分离到致病性菌株,该菌株能引起豌豆茎部、卷须萎蔫腐烂,叶片褪绿等症状。针刺接种豌豆,发生的病变状态与自然发病的症状相同,且在接种发病植株中又分离到形态上一致的病原菌,得到了柯赫法则的验证。经形态特征、培养性状、生理生化及16S rDNA序列分析,鉴定其为桃色欧文氏菌(Erwinia persicina)。这是我国首次从进境豌豆中检出该病害。
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  云南烟草上1种新的细菌性病害病原鉴定

  余磊, 秦西云, 杜静, 汪安云, 赵莹莹, 商珊, 申敦晋, 李昊, 黄琼

  植物病理学报. 2009, 39(3): 243-248.

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  2006~2007年在云南文山州的西畴县和保山市的昌宁县发现1种由细菌侵染引起的烟草新病害。主要发生在苗期(漂浮育苗)和移栽期,症状开始为白色至暗绿色小斑点、湿腐和茎上出现褐色斑点,在KB培养基上产生荧光。根据致病性、菌体形态、培养性状、生理生化反应、Biolog测试和16S rDNA序列分析将该病原菌鉴定为铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)。尽管该病害曾在菲律宾发生,但在中国尚属首次报道。
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  大麦黄矮病毒-GAV在燕麦植株体内运动规律的初步研究

  王亚南, 周锟, 王锡锋, 周广和

  植物病理学报. 2009, 39(3): 249-253.

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  利用RT-PCR方法研究了大麦黄矮病毒-GAV在燕麦植株内的移动规律。先将介体麦二叉蚜(Schizaphis graminum)在BYDV-GAV新鲜病叶上饲毒,再将获毒蚜虫放置到二叶期的健康燕麦植株接种48h,随后分期提取接种植株的第1~6片叶和根组织的总RNA,利用特异引物扩增BYDV-GAV的外壳蛋白(CP)基因以检测病毒在燕麦植株内的复制和移动。结果表明,在接种5d后,接种叶片(第2片叶)呈现阳性,接种7d后,植株新生的第4片叶被侵染,接种9d后,部分的第3片叶呈现阳性,至接种16d,几乎所有的叶片均呈现阳性。仅在接种的第5、7和9d收集的根组织呈现阳性,而所有的第1片叶均为阴性,可能是由于这些组织内病毒含量太低所致。本研究初步揭示了BYDV-GAV长距离运动的规律并且发现该病毒在燕麦根部从接种到系统发病都没有进行大量增殖,为今后进一步研究病毒运动机制选取适当的植物材料提供了基本信息。
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  马铃薯腐烂茎线虫28S rDNA-D2/D3区序列分析

  于海英, 彭德良, 胡先奇, 黄文坤

  植物病理学报. 2009, 39(3): 254-261.

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  我国危害甘薯的马铃薯腐烂茎线虫rDNA-ITS基因片段长度存在A型(900bp)和B型(1100bp)2个类型,A型腐烂茎线虫群体的ITS片段比B型群体少200bp。为了进一步研究这2种类型群体的发育关系,本文用线虫通用引物D2A和D3B对来自国内的21个马铃薯腐烂茎线虫群体和1个韩国的马铃薯腐烂茎线虫28SrDNA-D2/D3区进行了PCR扩增,均产生大小一致的片段,长度约为780bp,克隆、测序后用DNAMAN5.2软件和MEGA4软件进行分析比对,结果表明我国21个马铃薯腐烂茎线虫群体28SrDNA-D2/D3区只有20余个碱基的差异,相似率达97.2%。基于UPGMA构建的系统发育树很好地区分了马铃薯腐烂茎线虫A型和B型群体,展现出了群体的来源及发育关系。
细胞生物学、生理学、生物化学、分子生物学
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  水稻基腐病菌毒素对烟草活性氧代谢及细胞超微结构的影响

  刘琼光, 张静一, 冯敏珊, 王振中

  植物病理学报. 2009, 39(3): 262-271.

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  用水稻基腐病菌毒素注射烟草叶片后,烟草细胞中O₂^-_·和NO大量增加,H₂O₂含量明显降低,SOD、CAT和POD等酶的活性发生变化。毒素引起烟草细胞死亡,但没有细胞程序性死亡(PCD)的DNA梯特征。病菌毒素处理烟草叶片后,电导率增大,细胞膜透性增加。电镜观察烟草细胞的超微结构表明,毒素处理8h后,叶绿体变形,叶绿体基质片层大部分消解,基粒结构消失,叶绿体外膜和内膜剥离,质壁分离和细胞膜内陷,细胞器消解;处理48h后,细胞内含物完全消解,细胞膜消失,细胞壁皱缩变形。本研究表明,毒素引起烟草细胞死亡与植物抗病反应HR中细胞坏死的生理生化机制不同,但可能存在相似的信号传导途径。

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  水稻转录因子OsBTF3对不同病原菌和信号分子的基因表达反应

  李广旭, 吴茂森, 何晨阳

  植物病理学报. 2009, 39(3): 272-277.

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  转录因子基因OsBTF3在水稻品种日本晴悬浮细胞中受白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae,Xoo)诱导表达。为了阐明OsBTF3在水稻叶组织中的表达特征,本研究利用RT-Q-PCR技术,对经3种亲和性病原菌[水稻白叶枯病菌(Xoo)、水稻条斑病菌(Xooc)和稻瘟病菌(Mg)]接种和4种信号分子[脱落酸(ABA)、水杨酸(SA)、茉莉酸甲酯(MeJA)、乙烯(ETH)]诱导处理的水稻叶片中OsBTF3的转录本进行了定量分析。结果表明,OsBTF3对Xoo、Xooc和Mg侵染的基因表达反应均显著地受到诱导,但反应速度和强度略有差异。而4种信号分子对OsBTF3表达的诱导作用差异较大,ABA诱导活性最强,MeJA和ETH次之,SA诱导作用不显著。因此,OsBTF3基因表达不仅具有病原菌Xoo、Xooc和Mg的诱导性,而且也具有信号分子MeJA、ETH和ABA的应答性。
致病性与抗病性遗传
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  小麦条锈菌鉴别寄主Heines peko抗性遗传分析及SSR标记

  陈宏灏, 杨炜迪, 王美南, 井金学

  植物病理学报. 2009, 39(3): 278-284.

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  用中国条锈菌生理小种对欧洲鉴别寄主Heines peko进行抗条锈性遗传机制研究,将为挖掘新的抗条锈基因、培育优良抗条锈性品种奠定基础。用Heinespeko与小麦感病品种铭贤169杂交、自交获F₁、F₂和F₃代群体。对亲本及其后代分别在苗期接种条中30号、条中31号、条中32号和水-4,进行遗传分析。结果表明,Heines peko对条中30号小种的抗性由1对隐性基因控制。对条中31号、水-4的抗性均由1显1隐2对基因互补或抑制作用控制,Heines peko对2个小种的抗性可能由相同基因控制。对条中32号的抗性是由2对隐性基因相互抑制控制。利用分组分析法(BAS)对抗条中30号小种的遗传群体进行分子作图,筛选到1个位于2AS与抗条中30号小种基因连锁的SSR标记Barc212,用Barc212对170个F₂代单株分析表明,该基因与Barc212引物扩增位点的遗传距离为10.6cM。Barc212可作为抗条中30号基因的SSR标记。
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  小麦农家种红蚰麦抗白粉病遗传分析及SSR分子标记

  王俊美, 康振生, 刘红彦

  植物病理学报. 2009, 39(3): 285-289.

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  为明确小麦农家种红蚰麦抗白粉病的遗传基础,对红蚰麦和豫麦13的杂交F₂代群体进行了遗传分析,结果表明红蚰麦携带1对显性的抗白粉病基因(暂命名为Pmhym)。利用SSR标记和F₂代分离群体分组分析法,将该基因定位在7B染色体的长臂上,与3个微卫星标记Xwmc232、Xgwm577和Xwmc526连锁,遗传距离分别是14.3、25.6和57.2cM。分子标记分析表明该基因不同于已有被定位在7BL上的Pm5系列复等位基因,因而推测Pmhym是1个新的抗白粉病基因。上述结果将为开展Pmhym基因的精细定位奠定基础。
流行学与生态学
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  白粉菌侵染后田间小麦叶绿素含量与冠层光谱反射率的关系

  曹学仁, 周益林, 段霞瑜, 程登发

  植物病理学报. 2009, 39(3): 290-296.

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  本文对白粉菌侵染后田间小麦叶片叶绿素含量与光谱反射率的关系进行了研究。用不同浓度的药液控制田间病害的发生梯度,于灌浆期对不同严重度小麦冠层的光谱反射率进行了测量,同时测定小麦叶绿素含量并调查病情指数,分析叶绿素含量与病情指数、冠层光谱反射率的关系。结果表明,药剂对叶绿素含量无显著影响;受白粉病危害后,小麦叶片叶绿素含量明显降低,抗性不同的品种之间下降速度存在差异,与病情指数之间也有极显著的相关性。绿光波段与叶绿素含量之间的相关性达到了显著水平;基于多波段建立的模型要优于单波段,可以利用绿光、红光波段的反射率估计叶绿素含量。红边参数与叶绿素含量之间也有较好的相关性,其中以红边面积的相关系数最大。
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  云南辣椒疫病的分子诊断及其病原菌群体特征研究

  杨明英, 曹继芬, 李向东, 孙道旺, 王源超, 赵志坚

  植物病理学报. 2009, 39(3): 297-303.

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  对2005~2007年分离自云南省辣椒疫病的病原菌进行分子生物学鉴定,并对病原菌的群体特征进行研究。PCR特异性扩增表明,引起云南辣椒疫病的病原菌是辣椒疫霉。交配型测定显示,234个云南辣椒疫霉菌株由A1、A2和A1A2(自育型)3种交配型组成,以A2和A1A2交配型为主。其中,A2占45.3%,A1A2占43.2%,A1仅占11.5%。大部分产区3种交配型共存,在田间进行有性生殖的可能性很大。甲霜灵敏感性测定的200个菌株中,甲霜灵敏感菌株是主要菌系,占测定菌株的95.5%,中抗和抗性菌株比例较低,分别为2.0%和2.5%。抗药性菌株的出现与甲霜灵的选择压力有关。云南辣椒疫霉群体组成较为复杂,A1A2交配型可能在云南辣椒疫霉的有性生殖中起到了重要的作用,成为影响群体结构的一个重要途径。
研究简报
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  土壤中棉花黄萎病菌快速检测技术研究

  高峰, 刘培源, 马江峰, 李晖, 李国英

  植物病理学报. 2009, 39(3): 310-313.

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  Verticillium wilt,caused by Verticillium dahliae,is the most important disease of cotton.In this work,the previously developed defoliating(D) and nondefoliating(ND) V.dahliae-specific primers were adopted for detection of pathotypes of V.dahliae in soil by using nested PCR.The results showed that the detection assay was efficient when used in infested soil and was an useful technique for rapid and accurate assessment of soil contamination by V.dahliae.
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  北京地区柴胡根腐病的病原菌鉴定

  李勇, 刘时轮, 杨成民, 魏建和, 丁万隆

  植物病理学报. 2009, 39(3): 314-317.

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  Root rot disease is one of the most important diseases of Bupleurum chinense DC..Pure isolates from host tissues were obtained.The results of pathogenicity test,morphology observation and ITS sequence analysis indicated that the disease was caused by Fusarium oxysporum.
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  罗汉果青枯病病原菌株的鉴定

  王涛, 林纬, 黄永禄, 袁高庆, 黎起秦

  植物病理学报. 2009, 39(3): 318-320.

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  The pathogen of Siraitia grosvenorii wilt was identified.Six strains were isolated from diseased plants of S.grosvenorii collected from Yongfu County in Guangxi.By using bacteriological identification,pathogenicity tests assay,16S rDNA sequence analysis,the S.grosvenorii wilt was caused by Ralstonia solanacearum.The results of pathogenicity and carbohydrate utilized test demonstrated that the pathogen belonged to race 1 and biovarⅢ of R.solanacearum.
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  同步检测为害百合种球3种检疫性病毒的多重RT-PCR方法

  杨翠云, 张丽莉, 于翠, 戚龙君

  植物病理学报. 2009, 39(3): 321-324.

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  The multiplex RT-PCR approach was developed for simultaneous detections of Arabis mosaic virus(ArMV),Strawberry latent ringspot virus(SLRSV)and Lily symptomless virus(LSV)from the imported lily bulbs.The results indicated that good specificity and sensitivity for simultaneous detection were obtained.The ultimate of RNA detection with three viruses mixture was 305 pg.The ultimate of RNA detection with ArMV,SLRSV and LSV were 156.0,13.4 pg and 1.12 ng respectively.This approach has potential to be used in quarantine of imports and exports.
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  香蕉果实炭疽病病程相关基因cDNA片段克隆

  陈弟, 谭志琼, 殷晓敏, 徐碧玉, 金志强, 张荣意

  植物病理学报. 2009, 39(3): 325-327.

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  A suppression subtractive hybridization(SSH) cDNA library was constructed from 5 d lesion of banana fruit inoculated with Colletotrichum musae F1.70 cDNA clones selected randomly were sequenced and analysed.The result showed that 29 cDNA clones were related to disease resistance.They were chitinase,se-rine/threonine phosphate,Leucine-rich repeat(LRR),isoflavone reductase and so on.
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  外源茉莉酸和真菌激发子诱导白菜CaMBP10的表达

  胡文全, 谢万钦, 张蕊, 张映熠, 李翠凤

  植物病理学报. 2009, 39(3): 328-332.

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  Recently,CaMBP10 was identified as a plant lipid transfer protein(LTP).In the study,four leaves old cabbages were treated with exogenous jasmonic acid(JA),JA plus LTP,fungal elicitor,200 mmol/L NaCl and 20% PEG respectively for understanding the functions of CaMBP10 in vivo.The expression of CaMBP10 was determined by using semi-quantitative RT-PCR.The results showed that the expressions of CaMBP10 were dramatically up-regulated in different levels under indicated conditions.It demonstrated that CaMBP10 was involved in biotic and abiotic stress response.
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  红树内生细菌RS261菌株防治辣椒疫病的初步研究

  柳凤, 欧雄常, 何红, 胡汉桥, 张小媛

  植物病理学报. 2009, 39(3): 333-336.

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  The endophytic Bacillus amyloliquefaciens strain RS261 is a biological agent isolated from the leaf of Rhizophora stylosa.The efficacy of RS261 strain on control of capsicum phytophthora blight caused by Phytophthora capsici was studied by seed socking,root drenching and fruit spraying.The results showed that good biocontrol efficacy was achieved.It indicated that biocontrol with endophytic bacteria was an atternative and potential methed to control the capsicum seedlings and fruits phytophthora blight.